Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-ALK para WB, ELISA - Q9UM73

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ALK

• Funciona como uma receptor tirosina quinase neuronal expresso transitoriamente em regiões específicas do SNC e SNP, sendo crítico para a gênese e diferenciação do sistema nervoso. Referências relacionadas: PMID:11121404 PMID:11387242 PMID:16317043
• Atua como uma proteína chave associada à magreza em neurônios hipotalâmicos, regulando o gasto energético ao controlar negativamente a lipólise do tecido adiposo branco e o tônus simpático, ajustando assim a homeostasia energética.
• Após a ligação do seu ligante ALKAL2 (mas não de ALKAL1), ALK ativa a via de sinalização MAPK, transduzindo sinais extracelulares em respostas intracelulares. Referências relacionadas: PMID:30061385 PMID:33411331 PMID:34646012 PMID:34819673
• Fosforila quase exclusivamente na primeira tirosina do motivo Y-x-x-x-Y-Y, e induz a fosforilação de tirosinas de adaptadores downstream como CBL, FRS2, IRS1, SHC1 e das MAPKs ERK1/2. Referências relacionadas: PMID:15226403 PMID:16878150
• Pleiotrofina (PTN) e midkina (MDK) também podem regular a ativação de ALK: PTN desencadeia sinais antiapoptóticos e proliferativos mediados pela via MAPK, enquanto MDK induz a fosforilação de IRS1, MAPKs e PI3K para promover a proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:11278720 PMID:11809760 PMID:12107166 PMID:12122009
• Induz a ativação de NF-kappa-B, provavelmente via IRS1 e AKT, o que é essencial para a sinalização autócrina de crescimento e sobrevivência mediada por MDK. Referências relacionadas: PMID:15226403 PMID:16878150
• Localizado na membrana celular como um receptor transmembrana de passagem única, com seu domínio quinase dentro da célula.
• Expresso no cérebro, SNC, intestino delgado e testículo, mas ausente em células linfoides normais; frequentemente envolvido em rearranjos cromossômicos em câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1334–1520 dentro do domínio quinase citoplasmático; certifique-se de que o epitopo alvo está preservado nas suas condições experimentais, especialmente ao usar amostras truncadas ou desnaturadas.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 176 kDa; considere usar um marcador de faixa de peso molecular alto e tempos de transferência prolongados para garantir a transferência eficiente dessa proteína de grande tamanho.
• Ao realizar ELISA, controles adequados como a proteína ALK recombinante ou lisados de linhagens celulares que expressam ALK (por exemplo, neuroblastoma) podem ser usados para avaliar a especificidade e sensibilidade do ensaio.
• Dado que a ativação do receptor é documentada por múltiplos ligantes (ALKAL2, PTN, MDK), confirme o status de ativação no seu sistema celular monitorando eventos de fosforilação downstream (por exemplo, ERK1/2 ou IRS1) se você estiver estudando ALK competente para sinalização.

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