Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfatase Alcalina (ALPL) para WB, IHC-P, ELISA - P05186

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Fosfatase Alcalina (ALPL)

• A fosfatase alcalina, isoenzima inespecífica de tecido (ALPL), é expressa no fígado, osso e rim, conforme indicado pelo seu nome alternativo.
• Catalisa a hidrólise de pirofosfato (PPi) em fosfato, removendo um potente inibidor da mineralização, promovendo assim a formação de cristais de hidroxiapatita nos ossos e dentes. Referências relacionadas: PMID:12162492, PMID:23688511, PMID:25982064
• A ALPL desfosforila o piridoxal 5′-fosfato (PLP) em piridoxal (PL), a forma transportável da vitamina B6, essencial para a síntese de neurotransmissores no cérebro. Referências relacionadas: PMID:20049532, PMID:2220817
• A enzima está localizada na membrana celular, membranas de vesículas extracelulares e membranas mitocondriais, onde participa de diversos processos fisiológicos.
• Nas células adiposas termogênicas, a ALPL mitocondrial medeia a hidrólise de N-fosfocreatina, impulsionando um ciclo fútil de creatina que dissipa energia na forma de calor para a termogênese adaptativa (Por similaridade).
• Pode desfosforilar produtos microbianos como lipopolissacarídeos (LPS) e poli I:C, sugerindo um papel na modulação de respostas imunes inatas. Referências relacionadas: PMID:28448526

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa1-100); esta região pode estar oculta ou clivada na enzima madura. Confirme o reconhecimento da proteína nativa em seu sistema experimental.
• Para Western blot (WB), uma banda em ~57 kDa (precursor) ou ~80 kDa (madura, glicosilada) pode ser observada dependendo da preparação da amostra; considere o uso de lisados frescos e inibidores de proteases.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno pode ser necessária para secções fixadas em formalina e embutidas em parafina; valide em tecidos que expressam ALPL, como osso, fígado ou rim.
• Para aplicações de ELISA, recomenda-se o emparelhamento com um anticorpo de detecção que visa um epítopo distinto para o formato sanduíche.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é confirmada; no entanto, a homologia da sequência deve ser verificada se for utilizada em outras espécies.
• Evite múltiplos ciclos de congelamento e descongelamento; alíquota e armazene a -20°C ou -80°C conforme apropriado.

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