Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ALKBH1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13686

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ALKBH1

• A ALKBH1 é uma dioxigenase de ácidos nucleica que atua sobre o DNA e o tRNA, exigindo oxigênio molecular, alfa-cetoglutarato e ferro como cofatores. Referências relacionadas: PMID:18603530 PMID:27497299
• Ela funciona principalmente como uma tRNA desmetilase, removendo N1-metiladenina de vários tRNAs, com preferência pela posição 58 (m1A58) no loop T, regulando assim a iniciação e o alongamento da tradução. Referências relacionadas: PMID:27745969
• Nas mitocôndrias, a ALKBH1 oxida o mt-tRNA(Met) na citosina (34) em 5-formilcitosina, expandindo o reconhecimento de códon para ler AUA além de AUG. Referências relacionadas: PMID:27497299
• A ALKBH1 também desmetila N6-metiladenina no DNA, particularmente em elementos repetitivos L1 em células-tronco embrionárias, contribuindo para o silenciamento. Referências relacionadas: PMID:30017583 PMID:30392959
• A ALKBH1 exibe atividade de DNA liase, clivando sítios abásicos no DNA, o que gera adutos covalentes proteína-DNA; esta atividade não requer alfa-cetoglutarato. Referências relacionadas: PMID:19959401 PMID:23577621
• A proteína se localiza tanto no núcleo quanto nas mitocôndrias.
• A ALKBH1 é expressa de forma ubíqua em todos os tecidos humanos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 110-389 da ALKBH1 humana, uma região que compreende o domínio catalítico. Este design pode conferir forte reatividade contra a proteína de comprimento total.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 44 kDa. Bandas adicionais podem aparecer devido a splicing alternativo, modificações pós-traducionais ou detecção de homologos como a Alkbh1 de camundongo.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, espera-se coloração tanto nos compartimentos nuclear quanto mitocondrial, consistente com a localização dupla da ALKBH1.
• Ao realizar imunoprecipitação, observe que a ALKBH1 interage com ácidos nucleicos; inclua tratamento com nuclease, se necessário.
• O desempenho do ELISA deve ser validado usando o antígeno recombinante ou lisados de células/tecidos relevantes; considere os efeitos de matriz em amostras complexas.
• Reatividade cruzada com a ALKBH1 de camundongo é esperada, mas confirme a identidade da sequência na região do imunógeno para outras espécies, se necessário.

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