Anticorpo Policlonal Anti-alfa 1 Espectrina para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P02549

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da alfa 1 Espectrina

• A cadeia alfa da espectrina, eritrocítica 1 (SPTA1) é o principal constituinte da rede citoesquelética subjacente à membrana plasmática do eritrócito.
• Associa-se à banda 4.1 e à actina para formar a superestrutura citoesquelética da membrana plasmática do eritrócito, mantendo a forma e a estabilidade celular.
• SPTA1 está localizada no citoplasma, citoesqueleto e córtex celular, refletindo seu papel nas interações membrana-citoesqueleto.
• A proteína contém múltiplas repetições de espectrina, um domínio SH3 e um motivo EF-hand de ligação ao cálcio, que são críticos para suas funções estruturais e de sinalização.
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas com funções específicas de tecido, expandindo a diversidade funcional da espectrina.
• Mutações no gene SPTA1 estão ligadas a eliptocitose hereditária, poiquilocitose piropoiquilocítica e anemia hemolítica, destacando sua relevância clínica.
• Estudos de fosforilação e proteômica identificaram a SPTA1 como um nó central na biologia do eritrócito e na mecânica da membrana.
• O peso molecular é de aproximadamente 280 kDa, conforme derivado da sequência e confirmado por análise em SDS-PAGE.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 940-1160) cobre uma região central de repetição, que pode reconhecer múltiplos isoformas da SPTA1; valide a especificidade em seu sistema experimental.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é ~280 kDa; use géis de poliacrilamida de baixa porcentagem (ex.: 6%) e condições de transferência úmida otimizadas para proteínas de alto peso molecular.
• Na imunofuorescência (IF) e imuno-histoquímica (IHC), otimize a fixação (ex.: PFA a 4%) e a permeabilização para preservar o citoesqueleto da membrana eritrocitária; a recuperação antigênica pode melhorar a acessibilidade do epítopo.
• Para ELISA, considere revestir com o imunógeno recombinante ou extratos de membrana eritrocitária, e faça titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal.
• Reatividade cruzada com SPTA1 de camundongo e rato foi relatada; realize validação específica para a espécie se usar amostras desses organismos.

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