Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-alfa 1 Espectrina para WB e ELISA - P02549

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da alfa 1 Espectrina

• A proteína codificada pelo gene SPTA1 é a cadeia alfa da espectrina, eritrocítica 1, também conhecida como alfa-espectrina eritróide. É um componente estrutural chave do citoesqueleto da membrana de eritrócitos.
• A espectrina é o principal constituinte da rede citoesquelética que se encontra sob a membrana plasmática do eritrócito, onde se associa à banda 4.1 e à actina para formar uma superestrutura que mantém a forma e a elasticidade celular.
• A cadeia alfa da espectrina contém múltiplas repetições de espectrina, um domínio SH3 e um motivo EF-mão de ligação a cálcio, contribuindo para sua capacidade de se ligar à actina e organizar o citoesqueleto cortical.
• Subcelularmente, a alfa 1 espectrina está localizada no citoplasma, no citoesqueleto e no córtex celular, o que é consistente com seu papel de suporte à membrana plasmática.
• Mutações no gene SPTA1 estão associadas a eliptocitose hereditária e piropoicilocitose, destacando sua função crítica na integridade dos eritrócitos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, que pode regular as interações da espectrina e a dinâmica citoesquelética.
• O splicing alternativo do SPTA1 produz múltiplas isoformas com padrões de expressão específicos por tecido.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para uma região interna (aminoácidos 2300–2400), o que indica que o anticorpo reconhece um epítopo linear. Para Western blot, considere usar um sistema de gel desnaturante e otimizar as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular (~280 kDa).
• Dado o peso molecular previsto de 280 kDa, um gel de poliacrilamida de baixa porcentagem (ex: 6–8%) e tempos de transferência prolongados podem melhorar a detecção. Inclua marcadores de peso molecular apropriados para confirmar o tamanho da banda.
• A reatividade cruzada do anticorpo com humano, camundongo e rato indica conservação da sequência do epítopo. Valide o desempenho do anticorpo em lisados de amostras relevantes (ex: linhagens de células de eritrócitos ou eritroleucemia) para confirmar a especificidade.
• Para aplicações de ELISA, o design do imunógeno peptídico suporta formatos de ensaio direto ou indireto. Otimize as condições de revestimento e use alfa 1 espectrina recombinante ou purificada como controle positivo, quando disponível.

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