Anticorpo Policlonal Anti-Alpha-2-Macroglobulina (A2M) para WB - P01023

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alpha-2-Macroglobulina (A2M)

• A Alpha-2-macroglobulina (A2M) é uma grande glicoproteína plasmática e membro da família das alfa-macroglobulinas, também conhecida como proteína 5 contendo domínio de alfa-2-macroglobulina tipo C3 e PZP (CPAMD5).
• A A2M atua como um inibidor de proteases de amplo espectro, capaz de inibir todas as quatro classes de proteinases (serina, cisteína, áspartica e metaloproteinases) através de um mecanismo único de "captura".
• A proteína contém uma "região de isca" com locais de clivagem específicos; após a clivagem proteolítica, uma alteração conformacional aprisiona a proteinase e uma ligação tioéster media a ligação covalente à enzima.
• Após a clivagem, a proteinase aprisionada permanece ativa contra substratos de baixo peso molecular, mas apresenta uma atividade muito reduzida contra substratos de alto peso molecular.
• A A2M é secretada para o plasma sanguíneo e funciona como um "scavenger" (removedor) extracelular chave de proteases, contribuindo para a regulação da coagulação, fibrinólise e inflamação.
• A proteína contém múltiplas características estruturais, incluindo um peptídeo sinal, ligações dissulfeto, locais de glicosilação e uma ligação tioéster interna; o seu peso molecular maduro é de aproximadamente 163 kDa.
• Estudos estruturais tridimensionais elucidaram as alterações conformacionais subjacentes ao mecanismo de captura.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio foi desenhado contra um fragmento recombinante correspondente aos aminoácidos 1155–1474, que inclui o domínio de ligação ao receptor C-terminal; considere isto ao avaliar a reatividade do anticorpo com diferentes conformações ou fragmentos da A2M.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em ~163 kDa em condições redutoras ou não redutoras; valide a deteção no sistema de amostra relevante e considere a pré-adsorção para alta especificidade.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), os métodos apropriados de recuperação de antigénio e as condições de fixação do tecido devem ser otimizados experimentalmente.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; o emparelhamento com outro clone ou conjugado deve ser validado no formato de ensaio específico.
• A reatividade cruzada com outros membros da família das alfa-macroglobulinas (por exemplo, proteína da zona gravídica) não foi testada; confirme a especificidade se necessário.

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