Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Alfa-2-Macroglobulina (A2M) para WB, ELISA - P01023

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Alfa-2-Macroglobulina (A2M)

• A alfa-2-macroglobulina (A2M) é uma glicoproteína plasmática grande que atua como um inibidor de protease de amplo espectro, capaz de aprisionar proteinases de todas as quatro classes catalíticas através de um mecanismo único de mudança conformacional.
• A proteína contém uma "região de isca" com sítios de clivagem específicos; a clivagem proteolítica dentro desta região desencadeia uma grande reorganização estrutural que aprisiona fisicamente a protease invasora.
• Após a clivagem da região de isca, uma ligação de tioéster interna é hidrolisada, permitindo a ligação covalente da A2M à protease. Isso aprisiona a enzima mantendo sua atividade em direção a pequenos substratos, mas restringindo o acesso a grandes.
• Codificada pelo gene A2M (ID do Gene: 2), a A2M pertence à família da alfa-2-macroglobulina, que inclui proteínas relacionadas como PZP (proteína da zona gravídica) e o componente do complemento C3.
• A A2M é secretada e encontrada principalmente no plasma, onde desempenha um papel fundamental na regulação de cascatas proteolíticas, modulação da inflamação e manutenção da homeostase.
• Modificações pós-traducionais incluem ligações dissulfeto, glicosilação N-ligada e a ligação de tioéster única que forma uma ligação isopeptídica durante o aprisionamento da protease.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1155–1474 da A2M humana, uma região que pode conter partes da região de isca e do domínio de tioéster. Os pesquisadores devem considerar a verificação da reatividade com as formas nativas e desnaturadas em seus sistemas de ensaio.
• Para Western blotting (WB), uma banda próxima de 163 kDa pode ser observada em condições redutoras; a validação usando controles positivos e negativos (por exemplo, amostras de plasma humano, de camundongo ou de rato) é recomendada.
• Para aplicações de ELISA, o uso de conjuntos de anticorpos pareados ou formatos sanduíche pode ser explorado. Titule o anticorpo cuidadosamente para otimizar a relação sinal-ruído.
• Devido à reatividade cruzada com a A2M de camundongo e rato, este anticorpo pode ser adequado para estudos translacionais; no entanto, a homologia da sequência específica da espécie deve ser examinada para a região do epítopo.

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