Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-AMBP para WB, ELISA - P02760

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMBP

• O gene AMBP codifica uma proteína precursora que é clivada em duas cadeias funcionais: alfa-1-microglobulina (proteína HC/A1M) com atividades antioxidantes e de reparo tecidual, e bikunina, um inibidor de serina protease do tipo kunitz.
• A alfa-1-microglobulina (A1M) exibe atividades de redutase, ligação ao heme e eliminação de radicais. Reduz a metahemoglobina extracelular, liga e degrada o heme livre para prevenir hemólise e protege contra danos oxidativos a partículas de lipoproteína de baixa densidade e estruturas da matriz extracelular. Referências relacionadas: PMID:11877257 PMID:15683711 PMID:22096585 PMID:32092412 PMID:25698971
• Dentro das mitocôndrias, a A1M associa-se ao complexo I da cadeia respiratória, mantendo a homeostase redox ao eliminar radicais livres e reduzir o citocromo c de Fe3+ para Fe2+. Referências relacionadas: PMID:23157686 PMID:32823731
• A bikunina funciona como um inibidor de serina protease do tipo Kunitz, inibindo efetivamente calicreína, granzima K, plasmina, fator Xa, tripsina, quimase e triptase. Desempenha um papel na modulação da inflamação das vias aéreas e respostas citotóxicas. Referências relacionadas: PMID:10480954 PMID:15917224 PMID:16873769
• A bikunina também é um componente estrutural da matriz extracelular, contribuindo para a remodelação do espaço extracelular e adesão celular. Ela faz parte do complexo inibidor inter-alfa-tripsina, facilitando a transferência da cadeia pesada para o hialuronano, e inibe a cristalização do oxalato de cálcio. Referências relacionadas: PMID:20463016 PMID:25301953 PMID:16873769 PMID:7676539
• A AMBP é amplamente expressa pelo fígado e secretada no plasma, urina e líquido cefalorraquidiano. Também é detectada em glóbulos vermelhos, tecido placentário, queratinócitos, derme e epitélio das vias aéreas. Subcelularmente, localiza-se no espaço extracelular, retículo endoplasmático, citoplasma, membrana celular, membrana nuclear e membrana interna mitocondrial.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado abrange os aminoácidos 20-202 da AMBP humana, cobrindo a cadeia da alfa-1-microglobulina (A1M). Espera-se que o anticorpo reconheça a A1M e também possa detectar o precursor de comprimento total; considere isso ao interpretar bandas no Western blot.
• No WB, a AMBP de comprimento total tem um peso molecular previsto de ~39 kDa; no entanto, cadeias processadas ou formas glicosiladas podem aparecer em tamanhos diferentes. Utilize marcadores de peso molecular apropriados e considere condições redutoras vs. não redutoras.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de detecção. Se um formato de ELISA sanduíche for desejado, o pareamento com um anticorpo de captura monoclonal específico para um epítopo diferente pode melhorar a especificidade do ensaio.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com a AMBP de camundongo, indicando possível conservação do epítopo. A validação em amostras derivadas de camundongo é recomendada antes do uso em sistemas experimentais com camundongos.
• Devido à presença de ligações dissulfeto na bikunina, condições não redutoras podem ser necessárias para preservar o reconhecimento do epítopo se o alvo for a cadeia da bikunina.

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