Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-AMBRA1 para WB e ELISA - Q9C0C7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMBRA1

• A AMBRA1 é o componente de reconhecimento de substrato de um complexo de ligase E3 de ubiquitina-proteína DCX (DDB1-CUL4-X-box), mediando a poliubiquitinação de proteínas-alvo envolvidas na progressão do ciclo celular e autofagia. Referências relacionadas: PMID:20921139, PMID:23524951, PMID:24587252
• Atua como um regulador mestre a montante da transição G1/S, reconhecendo a ciclina-D fosforilada (CCND1, CCND2, CCND3) e direcionando-a para degradação dependente de ubiquitina, atuando assim como um supressor de tumor. Referências relacionadas: PMID:33854232, PMID:33854235, PMID:33854239
• Atua como um regulador chave da autofagia; após a indução da autofagia, é liberada do citoesqueleto para mediar a ubiquitinação ligada a 'Lys-63' de BECN1 e ULK1, aumentando a atividade de PIK3C3 e a estabilidade de ULK1 para promover a formação do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:20921139, PMID:23524951
• Promove a mitofagia interagindo com proteínas da família PRKN e LC3 para direcionar mitocôndrias danificadas aos autofagossomos, e atua como um cofator para a ubiquitinação mediada por HUWE1 de MFN2. Referências relacionadas: PMID:21753002, PMID:25215947, PMID:30217973
• Independentemente de sua função de ligase E3, a AMBRA1 regula a estabilidade de MYC e FOXO3 através de interações com a proteína fosfatase 2A (PPP2CA), levando à degradação de MYC e estabilização de FOXO3, impactando assim a proliferação celular e a diferenciação de células T reguladoras. Referências relacionadas: PMID:25438055, PMID:25803737, PMID:30513302
• A localização subcelular inclui citoplasma, citoesqueleto, retículo endoplasmático, autofagossomos, mitocôndrias, núcleo e adesões focais, refletindo seus papéis multifacetados no tráfego e sinalização celular.
• Modificada pós-traducionalmente por metilação e fosforilação, e contém repetições WD; também está envolvida na montagem de cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-63', crítica para a transdução de sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 961–1208 da AMBRA1 humana; portanto, o anticorpo provavelmente reconhece epítopos dentro desta região. No Western blot, espere uma banda em aproximadamente 143 kDa. Considere otimizar as condições de bloqueio e lavagem para minimizar o fundo.
• A reatividade cruzada confirmada em camundongo torna este anticorpo adequado para estudos em modelos de camundongo; no entanto, valide a detecção no tipo específico de tecido ou célula de interesse para garantir especificidade e sensibilidade.
• Para aplicações de ELISA, as condições de pré-revestimento e os sistemas de detecção devem ser otimizados empiricamente; considere usar proteína AMBRA1 recombinante ou lisados celulares como antígenos de revestimento.
• Devido ao splicing alternativo, múltiplas isoformas de AMBRA1 podem existir em certos tipos celulares; verifique o padrão de bandas detectado contra controles conhecidos em seu sistema experimental.
• Este anticorpo policlonal pode ser usado para imunoprecipitação ou imunofluorescência com validação adicional; a ligação inespecífica a outras proteínas contendo repetições WD é improvável, mas deve ser descartada por controles apropriados.

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