Anticorpo Monoclonal Anti-AMPK alfa 1/2 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPK Alfa 1/2

• A subunidade catalítica alfa-1 da AMPK (PRKAA1) atua como um sensor central de energia, ativando vias catabólicas e inibindo processos anabólicos durante o estresse energético celular para restaurar os níveis de ATP. Referências relacionadas: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• No metabolismo lipídico, a AMPK fosforila e inativa diretamente a acetil-CoA carboxilase (ACACA/ACACB) e a HMG-CoA redutase (HMGCR), suprimindo assim a síntese de ácidos graxos e colesterol.
• A AMPK regula a reprogramação transcricional por meio da fosforilação de fatores de transcrição e coativadores importantes (por exemplo, CRTC2, FOXO3, SREBF1, PPARGC1A) e da histona H2B, modulando a expressão de genes metabólicos. Referências relacionadas: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Por meio da fosforilação de RPTOR e TSC2, a AMPK inibe o complexo mTORC1, levando à redução do crescimento e da proliferação celular, e promove a autofagia durante a privação de nutrientes. Referências relacionadas: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641
• Subcelularmente, a AMPK alfa-1 localiza-se predominantemente no citoplasma e no núcleo, sendo também detectada em endossomos tardios, o que é consistente com seus diversos papéis na sinalização celular.
• A proteína está sujeita a fosforilação extensa em múltiplos resíduos de serina/treonina e, com base em identificações proteômicas, pode apresentar glicosilação ligada a N.
• A AMPK alfa-1 também apresenta atividade de quinase da proteína tau e pode fosforilar MAPT/TAU em resposta ao beta-amiloide, embora a relevância in vivo ainda não esteja clara.
• Este anticorpo reconhece tanto a subunidade catalítica alfa-1 (codificada por PRKAA1, UniProt Q13131) quanto a subunidade alfa-2 altamente homóloga (codificada por PRKAA2, UniProt P54646), tornando-o uma ferramenta pan-AMPK-alfa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os resíduos 13–300 da AMPK alfa-1 humana, incluindo o domínio quinase. Essa região é altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos, sustentando a ampla reatividade cruzada entre espécies relatada.
• Para Western blotting, espere uma banda predominante de aproximadamente 64 kDa. A AMPK alfa-1 endógena é amplamente expressa; considere utilizar lisados de linhagens celulares como HeLa e HEK293T ou de tecidos como fígado e músculo esquelético como controles positivos.
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, são esperados sinais citoplasmáticos e nucleares. A localização subcelular pode mudar sob condições específicas de estresse (por exemplo, privação de glicose e ativadores da AMPK); portanto, os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados para o compartimento-alvo.
• Para ensaios baseados em ELISA, a natureza monoclonal deste anticorpo garante consistência entre lotes; no entanto, os usuários devem validar as condições ideais de revestimento e detecção em seu sistema de ensaio específico.

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