Anti-AMPKa1/AMPKa2 Coelho pAb para WB, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKa1/AMPKa2

• A AMPK (proteína quinase ativada por AMP) é um sensor de energia heterotrimérico composto por uma subunidade catalítica α (PRKAA1/α1 ou PRKAA2/α2), uma subunidade regulatória β e uma subunidade γ. A subunidade α1 é uma serina/treonina quinase de 64 kDa crítica para a homeostase energética celular.
• Em resposta a baixos níveis de ATP, a AMPK ativa vias catabólicas e inibe processos anabólicos, como biossíntese de proteínas, carboidratos e lipídios, bem como crescimento e proliferação celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• A AMPK fosforila diretamente reguladores de transcrição (por exemplo, CRTC2, FOXO3, histona H2B, HDAC5, p53) para modular a expressão gênica e a estrutura da cromatina em resposta ao estresse metabólico.
  Referências relacionadas:
  PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Ela regula negativamente a sinalização do mTORC1 fosforilando TSC2, RPTOR, WDR24 e FNIP1, inibindo assim o crescimento celular e promovendo a autofagia em condições de baixa disponibilidade de nutrientes.
  Referências relacionadas:
  PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:36732624, PMID:37079666
• A AMPK promove a autofagia fosforilando e ativando diretamente ULK1 e WDR45.
  Referências relacionadas:
  PMID:21205641, PMID:28561066
• A AMPK está localizada no citoplasma e no núcleo, e pode associar-se a endossomos tardios, consistente com seus papéis na sinalização metabólica e no tráfego celular.
• Características pós-traducionais importantes incluem fosforilação (regulando sua atividade), ligação a nucleotídeos (AMP/ATP) e glicosilação. A enzima está envolvida em múltiplas vias, incluindo metabolismo de lipídios/esteróis, autofagia, ritmo circadiano e sinalização Wnt.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 13-300) abrange uma região altamente conservada de PRKAA1/PRKAA2, explicando a robusta reatividade cruzada com amostras de humano, camundongo e rato.
• Para Western blotting, as isoformas endógenas de AMPKα são detectadas como bandas em torno de 62–65 kDa; múltiplas bandas podem refletir estados de splicing diferencial ou fosforilação.
• O IHC-P pode exigir recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato pH 6.0) e titulação cuidadosa; recomenda-se a inclusão de controles de tecido positivo e negativo apropriados.
• Aplicações de ELISA podem ser estabelecidas usando padrões de proteína ou peptídeo recombinante; emparelhe com anticorpos secundários apropriados e otimize as condições de revestimento.

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