Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-AMPKα2 para Pesquisa de Metabolismo Energético - P54646

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AMPKα2

• Atua como subunidade catalítica da proteína quinase ativada por AMP (AMPK), um sensor mestre de energia que restaura o equilíbrio energético celular após a depleção de ATP.
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• Fosforila e inativa diretamente a acetil-CoA carboxilase (ACACA) e a redutase HMG-CoA (HMGCR), inibindo assim a síntese de ácidos graxos e colesterol.
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• Promove a captação de glicose no músculo facilitando a translocção de SLC2A4/GLUT4 para a membrana plasmática via fosforilação de TBC1D4/AS160.
• Regula negativamente a sinalização mTORC1 fosforilando TSC2 e RPTOR, ligando o estado energético ao crescimento celular e autofagia.
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• Modula a transcrição fosforilando reguladores-chave como CRTC2, FOXO3 e histona H2B, influenciando a estrutura da cromatina e a expressão gênica.
  Referências relacionadas: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Envolvido na sinalização de insulina e internalização de receptores, impactando a homeostase da glicose.
  Referências relacionadas: PMID:25687571
• Localiza-se no citoplasma, núcleo e endossomos tardios, refletindo seus diversos papéis regulatórios.
• Desempenha um papel no ritmo circadiano fosforilando CRY1 e na fragmentação mitocondrial sob estresse via fosforilação de MTFR1L.
  Referências relacionadas: PMID:36367943

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange os resíduos 270–343 dentro do domínio cinase catalítico de PRKAA2 humano; considere validar a especificidade do anticorpo em modelos de knockout ou knockdown.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 62 kDa; use lisados de células inteiras de tecidos/linhagens celulares humanas e de ratos com base na reatividade cruzada relatada.
• Na imunofluorescência/ICC, permeabilize as células para detectar os pools citoplasmáticos e nucleares; o sinal pode se localizar em estruturas pontilhadas possivelmente correspondentes a endossomos tardios.
• Para ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo usando o imunogênio recombinante como controle positivo.
• A inclusão de inibidores de fosfatases em tampões de lise é recomendada, pois o AMPKα2 é regulado por fosforilação.

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