Anticorpo Policlonal Anti-AMPKβ1 (Validado por KO) para WB, IF/ICC e ELISA - Q9Y478

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMPKβ1

• A subunidade beta-1 da proteína quinase ativada por 5'-AMP (AMPKβ1), codificada pelo gene PRKAB1, é uma subunidade reguladora não catalítica do complexo heterotrimérico da AMPK.
• A AMPKβ1 atua como uma proteína de suporte, conectando a subunidade catalítica α (PRKAA1/2) à subunidade reguladora γ (PRKAG1/2/3) por meio de seu domínio C-terminal, permitindo a montagem e a atividade do complexo.
• A AMPK funciona como um sensor energético essencial: em condições de baixo ATP intracelular, ativa vias catabólicas (que geram ATP) e inibe processos anabólicos (que consomem ATP), mantendo assim a homeostase energética.
• Por meio da fosforilação direta de enzimas metabólicas e da regulação indireta por meio da fosforilação de fatores de transcrição, a AMPK modula a biossíntese de lipídios, a oxidação de ácidos graxos e a síntese proteica.
• Além do metabolismo, a AMPKβ1 contribui para a regulação da polaridade celular e da remodelação do citoesqueleto de actina, provavelmente por meio da ativação da miosina, influenciando a estrutura e a migração celular.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo a miristoilação N-terminal, que pode facilitar a associação à membrana e o direcionamento subcelular, conforme refletido por palavras-chave como Lipoproteína e Miristato.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-80) da AMPKβ1 humana; esse desenho pode favorecer o reconhecimento da proteína de comprimento total e evitar o mascaramento do epítopo C-terminal por parceiros de interação.
• Para a análise por Western blot (WB) de lisados celulares humanos, de camundongo ou de rato, espera-se uma banda de aproximadamente 30 kDa; confirme a especificidade da banda utilizando em paralelo agonistas ou inibidores da AMPK, ou por meio de silenciamento mediado por siRNA/CRISPR.
• Em experimentos de imunofluorescência (IF/ICC), a localização subcelular da AMPKβ1 é dinâmica; inclua controles apropriados e valide-a no tipo celular e nas condições de tratamento de interesse.
• Para aplicações de ELISA, teste o desempenho do anticorpo com proteína AMPKβ1 recombinante ou lisados celulares e considere utilizar um par de captura/detecção compatível ao desenvolver um ensaio sanduíche.
• Como este é um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada; considere realizar um estudo de correlação ao incorporar um novo lote a fluxos de trabalho validados.

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