Anticorpo Policlonal Anti-AMT para WB, IF/ICC, ELISA - P48728

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da AMT

• A AMT codifica a aminometiltransferase, a proteína T do sistema mitocondrial de clivagem da glicina (GCS), também referido como complexo da glicina descarboxilase.
• O GCS catalisa a descarboxilação oxidativa da glicina em dióxido de carbono, amônia e uma unidade de um carbono, ligando o catabolismo da glicina ao metabolismo de um carbono mediado pelo folato e à biossíntese de nucleotídeos.
• A AMT é uma enzima dependente de fosfato de piridoxal (PLP) que transfere o grupo metilamina do intermediário proteína H para o tetraidrofolato, formando 5,10‑metilenotetraidrofolato e amônia.
• Localizada na matriz mitocondrial, a AMT suporta a principal via de degradação da glicina e fornece unidades de um carbono para processos citosólicos.
• O splicing alternativo produz múltiplas variantes de transcrito; variantes patogênicas na AMT estão associadas à hiperglicinemia não cetótica (encefalopatia por glicina), um distúrbio neurometabólico autossômico recessivo grave.
• A proteína apresenta um peptídeo de trânsito mitocondrial e é anotada com palavras-chave incluindo aminotransferase, variante de doença e proteoma de referência.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• A região do imunógeno (resíduos 107–386) está dentro da proteína madura, potencialmente permitindo a detecção de múltiplas isoformas; valide os padrões de bandas usando lisados enriquecidos de mitocôndrias ou de células inteiras de fígado ou rim, onde a AMT é abundantemente expressa.
• Para western blot, otimize a diluição do anticorpo primário com base na abundância do alvo e na sensibilidade de detecção no seu sistema de amostra; inclua um controle positivo conhecido (por exemplo, mitocôndrias de fígado de camundongo ou HepG2 humano).
• Na imunofluorescência, considere a co-coloração com um marcador mitocondrial (por exemplo, Tom20 ou MitoTracker) para confirmar a localização mitocondrial esperada.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar do uso de AMT recombinante como padrão para estabelecer um ensaio quantitativo robusto; verifique a linearidade e a recuperação na matriz biológica relevante.

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