Anticorpo policlonal anti-ANAPC11 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NYG5

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de ANAPC11/APC11

• ANAPC11, também conhecido como subunidade 11 do complexo promotor da anáfase, subunidade 11 do ciclossomo ou proteína de dedo RING associada ao carcinoma hepatocelular, é codificado pelo gene ANAPC11 e produz uma proteína de 10 kDa (Q9NYG5).
• É um componente central do complexo promotor da anáfase/ciclossomo (APC/C), uma ligase E3 de ubiquitina regulada pelo ciclo celular que controla a progressão do ciclo celular ao mediar a ubiquitinação e a degradação de proteínas-alvo. Referências relacionadas: PMID:11739784, PMID:18485873, PMID:27120157
• Juntamente com ANAPC2, ANAPC11 forma o componente catalítico da ligase E3, catalisando principalmente a formação de cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-11' e, em menor grau, de cadeias ligadas a 'Lys-48' e 'Lys-63'. Referências relacionadas: PMID:11739784, PMID:18485873, PMID:29033132
• O APC/C é ativado por CDC20 na transição da metáfase para a anáfase, tendo como alvo proteínas essenciais, como a ciclina B e a securina, para degradação; sua atividade é inibida pelo complexo do ponto de verificação mitótico (MCC) para retardar a segregação cromossômica. Referências relacionadas: PMID:27120157, PMID:27509861
• A proteína contém um domínio de dedo RING e liga-se a íons de zinco, características de sua atividade como ligase E3 de ubiquitina.
• ANAPC11 está localizado tanto no citoplasma quanto no núcleo, em consonância com seu papel na regulação do ciclo celular.
• É altamente expresso no músculo esquelético e no coração, com níveis moderados no cérebro, rim e fígado, e níveis baixos no cólon, timo, baço, intestino delgado, placenta, pulmão e leucócitos do sangue periférico.
• Foi observada a ocorrência de splicing alternativo em ANAPC11, potencialmente gerando múltiplas isoformas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-84) do ANAPC11 humano, que inclui o domínio de dedo RING; esse desenho pode preservar a acessibilidade do epítopo para a detecção da proteína endógena.
• Na análise por Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 10 kDa; recomenda-se utilizar condições otimizadas de transferência para proteínas de baixo peso molecular para evitar a perda de proteínas pequenas.
• Na imunofluorescência (IF/ICC) e na imuno-histoquímica (IHC-P), verifique a especificidade do anticorpo em tipos de tecido relevantes, como músculo esquelético ou coração, onde a expressão é alta, e inclua controles apropriados.
• O anticorpo foi validado em ELISA e pode ser considerado para a detecção quantitativa em lisados celulares ou em aplicações com proteína recombinante purificada.
• Foi relatada reatividade cruzada para humanos e camundongos; para outras espécies, a análise da homologia da sequência da região do imunógeno pode ajudar a prever a reatividade, mas recomenda-se a validação experimental.

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