Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ANGPT1 para WB, IHC-P, ELISA - Q15389

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Angiopoietina-1

• A Angiopoietina-1 (ANGPT1) é uma glicoproteína secretada que atua como ligante para o receptor tirosina quinase TEK/TIE2, desempenhando um papel central no desenvolvimento e manutenção vascular.
• Ao se ligar, a ANGPT1 induz a dimerização e fosforilação de tirosina do TEK, ativando cascatas de sinalização a jusante que regulam a sobrevivência, proliferação, migração, adesão e reorganização do citoesqueleto de actina das células endoteliais.
• Durante a embriogênese, a ANGPT1 é essencial para a angiogênese normal e o desenvolvimento cardíaco, atuando de forma tardia e distinta das vias mediadas pelo VEGF.
• Em células endoteliais quiescentes e confluentes, os oligômeros de ANGPT1 recrutam o TEK para as junções célula-célula, ativando preferencialmente a via PI3K-AKT para promover a estabilidade vascular e inibir a angiogênese.
• Em células endoteliais migratórias sem contatos célula-célula, a ANGPT1 ancora o TEK à matriz extracelular, estimulando a sinalização da quinase de adesão focal (FAK) e MAPK/ERK para impulsionar a angiogênese de brotamento.
• A ANGPT1 medeia a maturação e estabilização dos vasos sanguíneos e está implicada nas interações recíprocas entre o endotélio e o mesênquima circundante.
• A proteína sofre splicing alternativo, e a isoforma canônica contém um peptídeo sinal, domínios de hélice superenrolada (coiled-coil) e um domínio tipo fibrinogênio na extremidade C-terminal; está sujeita à formação de ligações dissulfeto e glicosilação.
• A ANGPT1 está associada a variantes de doença (por exemplo, HAE5) e é membro do proteoma de referência; é secretada para o espaço extracelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 277–498 do ANGPT1 humano, que abrange o domínio tipo fibrinogênio. Esta região é conservada em camundongos e ratos, consistente com a reatividade cruzada relatada do anticorpo. Para Western blotting, antecipe uma banda próxima de 58 kDa em condições redutoras; lisados de tecidos ricos em endotélio (por exemplo, pulmão, placenta) podem servir como controles positivos.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato) pode melhorar a coloração. A expressão endógena de ANGPT1 é frequentemente baixa; considere amplificar o sinal com sistemas de detecção sensíveis.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um anticorpo monoclonal validado pode aumentar a especificidade. Valide as condições do ensaio na matriz de amostra relevante.
• O anticorpo reconhece tanto a ANGPT1 endógena quanto a recombinante. Ao usar proteína recombinante como padrão, certifique-se de que ela cubra a sequência do imunógeno para verificar a reatividade do anticorpo.

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