Anticorpo policlonal de coelho anti-ANT1/ANT2/ANT3/ANT4 para WB, IHC-P, ELISA - P12235 / P05141 / P12236 / Q9H0C2

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de ANT1/ANT2/ANT3/ANT4

• ANT1 (SLC25A4) é um antiportador de ADP/ATP que catalisa a troca de ATP da matriz mitocondrial por ADP citosólico, uma etapa central no metabolismo energético celular.
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• A proteína funciona por meio de um mecanismo de acesso alternado, alternando entre estados abertos para o citoplasma e abertos para a matriz, expondo alternadamente um único sítio de ligação ao substrato a cada lado da membrana mitocondrial interna.
• ANT1 também medeia o desacoplamento mitocondrial ao atuar como transportador de prótons, um processo que reduz a eficiência da síntese de ATP e contribui para a termogênese; essa atividade requer ácidos graxos livres como cofatores.
• Participa do poro de transição de permeabilidade mitocondrial (mPTP), um poro inespecífico implicado na morte celular.
  Referências relacionadas: PMID:31883789
• Independentemente de sua função de transporte, ANT1 regula a mitofagia ao interagir com TIMM44, o que inibe a translocase TIM23 e estabiliza PINK1.
• A proteína está localizada na membrana mitocondrial interna e está sujeita a diversas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e S-nitrosilação.
• O anticorpo reconhece as quatro isoformas da translocase de nucleotídeos de adenina (ANT1–4), que compartilham sequências conservadas na região C-terminal.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo policlonal foi produzido contra um peptídeo sintético do C-terminal de ANT1 humano, uma região altamente conservada entre as isoformas de ANT, o que provavelmente explica sua ampla reatividade com ANT1–4.
• Para Western blot, as bandas esperadas estão em torno de 33 kDa (ANT1), 32 kDa (ANT2/3) e 35 kDa (ANT4); utilize controles de carregamento apropriados e valide a identidade das bandas com amostras submetidas a knockdown ou knockout.
• Na IHC-P, otimize a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo em tecidos de controle positivo conhecidos (por exemplo, coração ou músculo esquelético) antes de analisar as amostras experimentais.
• Para ELISA, considere utilizar o imunógeno peptídico como antígeno de revestimento positivo para verificar o título do anticorpo.

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