Anticorpo policlonal de coelho anti-ANXA1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04083

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ANXA1

• ANXA1, também conhecida como Anexina I, Lipocortina I ou Calpactina II, é um membro da superfamília das anexinas de proteínas de ligação ao cálcio e aos fosfolipídios.
• Funciona como um regulador essencial da resposta imune inata, apresentando atividade anti-inflamatória ao mediar os efeitos dos glicocorticoides e reduzir a inflamação na fase inicial. Referências relacionadas:
  • PMID:8425544
• ANXA1 contribui para a imunidade adaptativa ao modular a ativação das células T: intensifica as cascatas de sinalização após a ativação das células T, promove a diferenciação em células Th1 e regula negativamente a diferenciação Th2. Referências relacionadas:
  • PMID:17008549
• Liga-se ao cálcio com alta afinidade (até oito íons Ca2+) e associa-se às membranas fosfolipídicas de maneira dependente de Ca2+, participando da formação de estruturas fagocíticas e da reorganização do citoesqueleto de actina durante a fagocitose. Referências relacionadas:
  • PMID:2532504
  • PMID:8557678
• ANXA1 ativa os receptores de peptídeos formilados (FPRs) para promover a quimiotaxia de granulócitos e monócitos, a polarização celular, a migração e a resolução da inflamação e a cicatrização de feridas. Referências relacionadas:
  • PMID:15187149
  • PMID:22879591
  • PMID:25664854
• No contexto da imunidade antitumoral, ANXA1 interage com FPR1 nas células dendríticas para facilitar a captação e a apresentação cruzada de antígenos associados a tumores, desencadeando assim respostas específicas das células T.
• Subcelularmente, localiza-se no núcleo, no citoplasma, na membrana celular, nos endossomos, nas estruturas fagocíticas e nas vesículas secretoras, sendo também secretada no espaço extracelular e nos exossomos.
• A expressão tecidual inclui neutrófilos em repouso, células T do sangue periférico, placenta e fígado, com detecção em vesículas extracelulares do soro de pacientes com doença inflamatória intestinal.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno compreende a proteína ANXA1 humana de comprimento completo (resíduos 1-346); a natureza policlonal proporciona uma cobertura robusta de epítopos, mas a reação cruzada com outros membros da família das anexinas deve ser considerada quando houver similaridade de sequência.
• Para Western blot (WB), a banda prevista é de aproximadamente 39 kDa; observe que modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação e acetilação) podem causar pequenas alterações na migração. Valide no sistema de amostra relevante.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de recuperação antigênica e permeabilização, pois ANXA1 pode existir em compartimentos associados à membrana e no citosol. Um método de fixação adequado deve preservar essa distribuição.
• As aplicações em ELISA podem exigir a titulação do anticorpo e o bloqueio para evitar ligações inespecíficas; utilize controles relevantes em conjunto.
• Foi relatada reatividade cruzada com ANXA1 de rato, mas recomenda-se o alinhamento de sequências para outras espécies.

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