Anticorpo Policlonal Anti-APEX1/APE1 para WB, IF/ICC, ELISA - P27695

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do APEX1/APE1

• O APEX1 é uma proteína multifuncional com duas atividades principais: reparo de DNA através da função de endonuclease apurínica/apurimídínica (AP) no reparo de excisão de base (BER), e regulação redox de fatores de transcrição como FOS/JUN (complexo AP-1). Referências relacionadas: PMID:11118054 PMID:11452037 PMID:15831793
• A atividade de endonuclease AP catalisa a incisão hidrolítica da espinha dorsal fosfodiéster em locais AP no DNA, híbridos de DNA/RNA e RNA de fita simples, gerando uma quebra de fita simples com extremidades 5'-desoxirribose fosfato e 3'-hidroxila. Referências relacionadas: PMID:15380100 PMID:16617147 PMID:18439621
• Possui atividade de exodesoxirribonuclease 3'-5' em nucleotídeos mal emparelhados e atividade de fosfodiesterase de DNA 3', removendo lesões oxidativas como fosfoglicolato e 8-oxoguanina. Referências relacionadas: PMID:11832948 PMID:1719477 PMID:7516064
• O APEX1 participa da recombinação de troca de classe de imunoglobulinas processando locais AP nas regiões de troca, levando a quebras de fita dupla de DNA resolvidas pela união de extremidades não homólogas.
• Atua como uma endorribonuclease envolvida no controle de qualidade de RNA e no turnover de mRNA, incluindo a regulação da estabilidade do mRNA MYC. Referências relacionadas: PMID:19188445 PMID:19401441 PMID:21762700
• A proteína se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares: núcleo (incluindo nucléolo e speckles), citoplasma, mitocôndrias e retículo endoplasmático, refletindo suas diversas funções.
• Principais modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação, S-nitrosilação e ubiquitinação; a acetilação em Lis-6/7 estimula a atividade do promotor MDR1, contribuindo para a resistência a medicamentos. Referências relacionadas: PMID:18809583
• O APEX1 desempenha um papel na desmetilação do DNA, contribuindo para a regulação epigenética da expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:21496894

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1-318 do APEX1 humano (comprimento total), sugerindo que o anticorpo pode reconhecer as formas nativa e desnaturada. Para WB, espera-se uma banda próxima de 36 kDa; use controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de células HeLa ou HEK293) e valide com knockdown por siRNA, se necessário.
• Para IF/ICC, antecipe coloração nuclear e possivelmente citoplasmática ou mitocondrial. A coloração simultânea com marcadores de organelas (por exemplo, laminina para o núcleo, MitoTracker para mitocôndrias) pode ajudar a confirmar a especificidade.
• Em aplicações de ELISA, considere revestir com proteína recombinante APEX1 como padrão e testar em uma faixa de concentrações para otimizar a sensibilidade.
• Dado o papel do APEX1 na via BER, o anticorpo pode ser útil para detectar mudanças na expressão sob estresse oxidativo; inclua controles relevantes (por exemplo, células tratadas com H₂O₂) para correlacionar com vias de resposta ao dano no DNA.
• A reatividade cruzada é validada para humano; para outras espécies, verifique a homologia da sequência e realize experimentos piloto.

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