Anti-APOA1 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P02647

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Apolipoproteína A-I

• A apolipoproteína A-I (ApoA-I) é o principal componente proteico da lipoproteína de alta densidade (HDL) plasmática e também é encontrada em quilomícrons, desempenhando um papel central na homeostase do colesterol.
• Medeia o transporte reverso de colesterol, promovendo o efluxo de colesterol dos tecidos periféricos e atuando como um cofator essencial para a lecitina-colesterol aciltransferase (LCAT), que esterifica o colesterol para seu empacotamento em partículas de HDL.
• A ApoA-I é uma proteína secretada sintetizada principalmente no fígado e no intestino delgado, sendo então liberada na circulação, onde se associa a partículas lipídicas.
• O gene APOA1 pertence ao cluster de genes apolipoproteína A1/C3/A4/A5 no cromossomo 11 e codifica uma pré-proproteína que sofre processamento proteolítico para gerar a proteína madura de 243 aminoácidos.
• Modificações pós-traducionais incluem oxidação em Met-110 e Met-136, que estão elevadas em indivíduos com fatores de risco para doença arterial coronariana, como tabagismo e variantes do gene eNOS; a proteína também pode ser glicada, nitrada e palmitoilada.
• A ApoA-I está implicada na amiloidose, onde certas variantes formam fibrilas amiloides, e na aterosclerose, onde formas oxidadas são enriquecidas em lesões aórticas e se correlacionam com a gravidade da doença.
• Como parte do complexo SPAP, a ApoA-I ativa a motilidade dos espermatozoides, indicando uma função extra-hepática além do transporte lipídico.
• A importância da proteína no metabolismo lipídico é destacada por sua associação com os níveis de HDL e doenças cardiovasculares, tornando-a um biomarcador chave e alvo terapêutico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 25–267, o que corresponde à forma secretada madura da ApoA-I humana; considere verificar a reatividade contra a proteína endógena em amostras biológicas relevantes (por exemplo, soro, plasma ou lisados de fígado).
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~28 kDa; uma banda próximo a esse tamanho em amostras humanas, de camundongo e de rato confirma a reatividade cruzada. Otimize a preparação da amostra para reduzir a interferência de lipídios se usar plasma ou soro.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), teste o anticorpo em cortes de tecido de fígado ou arterial aterosclerótico embebidos em parafina, usando recuperação de antígeno apropriada, pois a ApoA-I é extracelular e pode exigir condições suaves de recuperação.
• Para ELISA, valide o par de anticorpos no formato sanduíche se usado como reagente de captura ou detecção; a natureza policlonal pode fornecer amplificação de sinal, mas requer titulação cuidadosa.
• Ao trabalhar com formas oxidadas da ApoA-I, observe que a oxidação da metionina pode alterar o reconhecimento do epítopo; agentes redutores e amostras frescas são recomendados.

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