Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-ApoB (WB, IF/ICC, ELISA) - P04114

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Apolipoproteína B-100

• A Apolipoproteína B (ApoB) é um componente proteico principal dos quilomícrons (apoB-48), do LDL (apoB-100) e do VLDL (apoB-100). ApoB-48 e apoB-100 surgem do mesmo gene através da edição de RNA.
• A ApoB-100 funciona como um sinal de reconhecimento para a ligação celular e a internalização das partículas de LDL pelo receptor apoB/E, desempenhando um papel crítico na homeostase do colesterol.
• Subcelularmente, a ApoB-100 se localiza no citoplasma, é secretada e se associa a gotas lipídicas, refletindo seu papel na montagem e secreção de lipoproteínas.
• As modificações pós-tradução incluem acetilação, formação de pontes dissulfeto, glicosilação, palmitoilção e fosforilação, que podem regular sua função e estabilidade.
• A ApoB-100 contém domínios de ligação à heparina e está implicada na aterosclerose, tornando-se um alvo chave na pesquisa de doenças cardiovasculares.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB): Devido ao grande peso molecular (~516 kDa), use géis de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 4–6%) e tempos de transferência estendidos com metanol reduzido no tampão de transferência para garantir uma transferência eficiente.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC): As condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas, pois a ApoB é tanto citoplasmática quanto secretada; uma combinação de permeabilização com Triton X-100 e fixação com paraformaldeído pode ser eficaz.
• Para ELISA: O imunógeno recombinante (aminoácidos 28–330) pode servir como um controle positivo útil; considere testar uma variedade de diluições do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ótima.
• Valide a reatividade cruzada do anticorpo com amostras de camundongo e rato usando lisados de tecidos ou células apropriados, dada a alta homologia de sequência.

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