Anticorpo policlonal de coelho anti-APOBEC3G para WB, IHC-P, ELISA - Q9HC16

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da APOBEC3G

• APOBEC3G (A3G) é uma enzima de edição de DNA dC->dU pertencente à família APOBEC3 de citidina desaminases. Ela existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Atua como um potente fator de restrição contra o HIV-1 deficiente em Vif, desaminando citidina em uridina no DNA viral de fita simples, causando hipermutações de G para A no genoma proviral. Referências relacionadas: PMID:12808465, PMID:12808466, PMID:12809610
• A atividade antiviral se estende a outros retrovírus, incluindo SIV, HBV, EIAV, XMRV e SFV, e também inibe a mobilidade de retrotransposons LTR e não-LTR. Referências relacionadas: PMID:15031497, PMID:16378963, PMID:18448976, PMID:16527742
• Um mecanismo independente de desaminação contribui para os efeitos antirretrovirais antes da integração proviral. Referências relacionadas: PMID:12808465, PMID:12808466, PMID:12809610
• Subcelularmente, a APOBEC3G localiza-se no citoplasma, no núcleo e nos corpos P, com sua distribuição influenciada pelo estado de ativação celular.
• A expressão tecidual é observada no baço, nos testículos, no ovário, nos leucócitos do sangue periférico e nos linfócitos CD4+. Em células T CD4 em repouso e monócitos, ela existe como uma forma de baixa massa molecular (LMM), passando para complexos de alta massa molecular (HMM) após a ativação ou diferenciação, o que se correlaciona com o aumento da suscetibilidade ao HIV-1.
• Palavras-chave: defesa antiviral, imunidade inata, ligação a metais (zinco), fosfoproteína e ubiquitinação destacam sua regulação multifacetada e seu papel nas interações entre hospedeiro e vírus.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange o domínio de citidina desaminase (aa 60-330); portanto, é provável que o anticorpo reconheça tanto a APOBEC3G nativa quanto a desnaturada.
• Para Western blot, espere uma banda de aproximadamente 46 kDa; inclua controles positivos apropriados de lisados humanos, de camundongo ou de rato.
• A IHC-P pode exigir a otimização das condições de recuperação antigênica; valide a coloração utilizando tecido com expressão conhecida de APOBEC3G.
• A especificidade pode ser confirmada comparando os sinais em amostras knockout ou knockdown de APOBEC3G com os de amostras do tipo selvagem.

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