Anticorpo policlonal anti-Apolipoproteína D (APOD) para IHC-P e ELISA - P05090

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da apolipoproteína D

• A apolipoproteína D (APOD) é uma glicoproteína secretada de 21 kDa pertencente à família das lipocalinas, identificada inicialmente nas lipoproteínas de alta densidade (HDL) do plasma humano.
• A APOD participa de um complexo macromolecular com a lecitina-colesterol aciltransferase (LCAT) e provavelmente está envolvida no transporte e na ligação da bilina.
• A proteína pode transportar uma variedade de ligantes hidrofóbicos em diferentes contextos fisiológicos, sugerindo funções no metabolismo lipídico e na neuroproteção.
• A APOD é predominantemente secretada e expressa em vários tecidos, incluindo fígado, intestino, pâncreas, rins, placenta, glândulas adrenais, baço, cérebro fetal e lágrimas.
• Estruturalmente, a APOD contém pontes dissulfeto conservadas e uma modificação por ácido pirrolidona carboxílico, que contribuem para sua estabilidade e função.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e a proteína madura não possui o peptídeo-sinal, apresentando um peso molecular calculado de aproximadamente 21 kDa.
• Como membro do proteoma de referência, a APOD foi amplamente caracterizada por determinação de sua estrutura tridimensional e sequenciamento proteico direto, facilitando pesquisas com biomarcadores e diagnósticos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 21–189 da APOD humana madura, abrangendo a maior parte do domínio de ligação ao ligante; esse desenho pode favorecer a detecção de conformações nativas e parcialmente desnaturadas.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere protocolos de recuperação antigênica adequados para proteínas secretadas; um tampão de citrato suave (pH 6,0) e aquecimento moderado podem aumentar a exposição dos epítopos em cortes incluídos em parafina.
• Em aplicações de ELISA, a combinação deste anticorpo policlonal com um anticorpo monoclonal de captura pode melhorar a especificidade do ensaio; otimize as condições de revestimento e bloqueio utilizando a proteína recombinante como padrão de referência.
• Devido à natureza secretada da APOD, a preparação de amostras a partir de lisados de tecidos ou fluidos biológicos deve incluir inibidores de protease adequados para manter a integridade da proteína.
• Valide a especificidade da coloração comparando as intensidades dos sinais entre tecidos conhecidos por expressarem níveis altos (por exemplo, fígado e placenta) e baixos de APOD, e inclua um controle negativo com IgG de coelho pré-imune.

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