Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-APP (Proteína Precursor da Beta-Amilóide) [Validado por KO] para WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P05067

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do APP

• APP é um receptor de superfície celular que promove o crescimento de neuritos, adesão neuronal e sinaptogênese através de interações homofílicas (PubMed:25122912). Referências relacionadas: PMID:25122912
• Ele funciona como um receptor de membrana da cinesina I, mediando o transporte anterógrado axonal da beta-secretase e da presenilina 1 em direção às sinapses (PubMed:17062754, PubMed:23011729). Referências relacionadas: PMID:17062754 | PMID:23011729
• APP está envolvido na homeostase do cobre e no estresse oxidativo; APP metalado com cobre pode induzir morte neuronal ou potencializar a oxidação de lipoproteínas de baixa densidade mediada por Cu2+.
• Os peptídeos beta-amilóides derivados do APP são quelantes de metais lipofílicos que se ligam ao cobre, zinco e ferro, promovem a agregação da tau e contribuem para o estresse oxidativo e a neuroinflamação.
• O splicing alternativo gera isoformas como APP695 (predominante no tecido neuronal), APP751 e APP770 (não neuronais); a isoforma APP751 é abundante em linfócitos T, e a appicana é expressa em astrócitos.
• A localização subcelular inclui membrana celular, fossetas revestidas de clatrina, endossomos precoces, aparelho de Golgi, retículo endoplasmático, núcleo e projeções celulares como cones de crescimento; formas secretadas também são detectadas.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, glicosilação, formação de ligações dissulfeto e ubiquitinação; algumas isoformas possuem um domínio BPTI com atividade de inibidor de serina protease.
• Palavras-chave do UniProt incluem doença de Alzheimer, amiloidose, apoptose, adesão celular, cobre, ferro, ligação a zinco, neurodegeneração, via de sinalização Notch, inibidor de serina protease e conjugação Ubl.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos aminoácidos 671-770 do APP humano, que abrange a sequência da beta-amilóide; o anticorpo pode detectar APP de comprimento completo e fragmentos C-terminais que contêm essa região.
• Para WB, considere validar o anticorpo usando lisados de cérebro de humano, camundongo ou rato ou linhas celulares que expressam APP; uma banda de ~87 kDa é esperada para APP de comprimento completo.
• O anticorpo é validado por KO, o que o torna adequado para confirmar a eliminação do APP em linhas celulares por meio de WB.
• Para IHC-P, otimize a recuperação de antígeno e inclua controles apropriados; o sinal pode variar com a fixação e o processamento do tecido.
• No IF/ICC, espera-se coloração pontilhada de membrana e intracelular; utilize etapas apropriadas de permeabilização e bloqueio.
• A reatividade relatada do anticorpo em ELISA sugere potencial para detecção quantitativa de APP em soro, LCR ou ensaios de proteína recombinante; recomenda-se a realização de testes piloto com o seu formato específico de antígeno.

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