Anticorpo policlonal de coelho anti-APP para WB, IF/ICC, ELISA - P05067

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da APP

• A APP (proteína precursora do beta-amiloide) é uma proteína transmembrana do tipo I que sofre splicing alternativo para gerar várias isoformas, incluindo APP695, APP751 e APP770, sendo a APP695 predominante nos neurônios.
• Atua como um receptor de superfície celular nos neurônios, onde a interação homofílica entre moléculas de APP em células vizinhas promove a sinaptogênese. Referências relacionadas: PMID:25122912
• Funciona como um receptor de membrana da cinesina I, mediando o transporte anterógrado axonal da beta-secretase e da presenilina 1 em direção às sinapses. Referências relacionadas: PMID:17062754 PMID:23011729
• O processamento proteolítico produz peptídeos beta-amiloides, que são quelantes lipofílicos de metais envolvidos na patologia da doença de Alzheimer e podem induzir estresse oxidativo e neurotoxicidade.
• Localiza-se em vários compartimentos, incluindo a membrana celular, cones de crescimento, endossomos iniciais, retículo endoplasmático e aparelho de Golgi, podendo também ser secretada; além disso, aparece no núcleo e no citoplasma.
• Apresenta um amplo perfil de expressão tecidual, com níveis elevados no cérebro, rins, coração e baço; no cérebro adulto, o lobo frontal e o córtex perisilviano, incluindo os giros operculares, apresentam a expressão mais intensa.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blot (WB), considere uma faixa de diluição de 1:500–1:2000 e valide a banda esperada próxima de 87 kDa em lisados cerebrais humanos, de camundongo ou de rato. Use inibidores de protease para limitar a degradação da APP.
• Para imunofluorescência/imuno-histoquímica (IF/ICC), otimize uma diluição inicial de 1:50–1:200 e permeabilize as células para detectar os reservatórios intracelulares de APP. Inclua controles apropriados para confirmar a especificidade da marcação.
• Para ELISA, este anticorpo policlonal pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; verifique o desempenho com peptídeos recombinantes de APP e valide em matrizes de amostras relevantes, como soro ou LCR.
• O imunógeno, correspondente aos resíduos N-terminais 1-100, é conservado entre as principais isoformas; portanto, o anticorpo pode reconhecer várias espécies de APP e alguns fragmentos N-terminais.

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