Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-APRT (Validado por KD) para WB, IF/ICC, ELISA - P07741

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da APRT

• A adenina fosforibosiltransferase (APRT) catalisa a síntese de recuperação de AMP a partir de adenina e 5-fosforibosil 1-pirofosfato (PRPP), uma reação energeticamente menos dispendiosa do que a biossíntese de purinas de novo.
• Essa enzima fornece uma rota alternativa para manter os pools de nucleotídeos adenilados, sendo particularmente importante em tecidos com altas demandas energéticas ou capacidade limitada de síntese de novo.
• A APRT pertence à família das purinas/pirimidinas fosforibosiltransferases e é evolutivamente conservada entre as espécies.
• A proteína se localiza predominantemente no citoplasma, o que é consistente com seu papel no metabolismo citoplasmático de nucleotídeos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular a atividade ou estabilidade da enzima; o splicing alternativo produz múltiplas variantes de transcritos.
• Mutações no gene APRT estão associadas à deficiência de adenina fosforibosiltransferase, um distúrbio que leva à urolitíase por 2,8-diidroxoadenina e doença renal crônica (palavra-chave de variante de doença).
• O peso molecular da isoforma canônica é de aproximadamente 19,6 kDa, consistente com a banda observada de 20 kDa em Western blotting.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende a APRT humana de comprimento completo (resíduos 1–180), o que sugere reconhecimento de formas nativas e desnaturadas; valide em sistemas de amostras relevantes.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 20 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados e considere controles de carga para análise quantitativa.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, deve ser observada coloração citoplasmática; controles como linhas celulares knockout para APRT podem ajudar a confirmar a especificidade.
• O desempenho do ELISA pode depender das condições de revestimento e da diluição do anticorpo; recomenda-se a otimização.
• A reatividade cruzada com APRT de camundongo e rato foi confirmada, mas a homologia de sequência sugere o possível reconhecimento de outras espécies de mamíferos; verifique se for usado além de humano, camundongo ou rato.

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