Anticorpo policlonal de coelho anti-APRT para WB, IF/ICC, ELISA - P07741

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da APRT

• APRT (adenina fosforribosiltransferase) é a enzima que catalisa a formação de AMP a partir de adenina e pirofosfato de fosforribosila na via de recuperação de purinas, uma rota energeticamente menos dispendiosa do que a síntese de novo.
• A proteína é membro da família das glicosiltransferases, especificamente das pentosiltransferases, e atua como uma transferase.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcritos, embora a importância funcional das diferentes isoformas ainda precise ser esclarecida.
• A APRT está localizada principalmente no citoplasma, em consonância com seu papel no metabolismo de nucleotídeos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular a atividade ou a estabilidade da enzima.
• De acordo com o UniProt, a APRT possui a palavra-chave 'Variante associada a doença', indicando que mutações nesse gene estão associadas a doenças humanas.
• A proteína foi identificada em estudos de proteômica em larga escala, e sua estrutura tridimensional foi determinada.
• O peso molecular calculado é de aproximadamente 20 kDa (19,6 kDa).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido contra uma proteína recombinante que cobre todo o comprimento (aa 1-180) da APRT humana. Espera-se que reconheça tanto a APRT endógena quanto a superexpressa em amostras humanas, de camundongo e de rato.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 20 kDa. Otimize os controles de carregamento e a titulação do anticorpo para o tipo específico de sua amostra.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), a ligação inespecífica pode ser minimizada utilizando tampões de bloqueio adequados e controles com anticorpo secundário. Valide nas linhagens celulares relevantes.
• Para ELISA, considere utilizar o anticorpo como reagente de captura ou detecção em formatos indiretos ou sanduíche; a combinação com um anticorpo de detecção compatível pode melhorar a sensibilidade.
• Foi indicada reatividade cruzada com amostras humanas, de camundongo e de rato; no entanto, recomenda-se a análise da conservação do epítopo para outras espécies.
• O anticorpo é fornecido como um policlonal de coelho, e a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos.

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