Anticorpo Policlonal Anti-ARF6 para WB, IF/ICC, ELISA - P62330

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do ARF6

• O ARF6 (fator de ribosilação ADP 6) é uma pequena GTPase da família ARF, codificada pelo gene ARF6, que cicla entre o estado inativo ligado a GDP e o estado ativo ligado a GTP para regular múltiplos aspetos do tráfego de membrana intracelular.
• Como um interveniente central na reciclagem endocítica, o ARF6 controla o retorno de carga internalizada dos endossomas de reciclagem para a membrana plasmática, facilitando a remodelação do citoesqueleto e a migração celular (PubMed:11266366, PubMed:16737952, PubMed:18400762).
  Referências relacionadas: PMID:11266366 PMID:16737952 PMID:18400762
• Na sua forma ligada a GTP, o ARF6 media o transporte de proteínas palmitoiladas da rede trans-Golgi para a membrana plasmática, uma função crítica para a secreção polarizada e a entrega de recetores à superfície celular (PubMed:37461827).
  Referências relacionadas: PMID:37461827
• O ARF6 é essencial para a citocinese mitótica, localizando-se na fenda de clivagem e no corpo médio para garantir a separação adequada das células filhas.
• A proteína modula ativamente a morfologia neuronal regulando o desenvolvimento das espinhas dendríticas, a ramificação e a extensão dos filopódios, e potencializa o crescimento dos neuritos através da interação com a proteína adaptadora APBB1 (PubMed:14978216, PubMed:36250347).
  Referências relacionadas: PMID:14978216 PMID:36250347
• Durante a polarização epitelial, o ARF6 governa a remodelação das junções controlando os níveis superficiais de proteínas de junção aderente, como a CDH1, e desempenha um papel na reciclagem do NTRK1 a partir de endossomas precoces (PubMed:36017701).
  Referências relacionadas: PMID:36017701
• O ARF6 também está implicado na patogénese microbiana: ativa alostericamente a toxina da cólera e facilita a entrada do enterovírus 71 nas células endoteliais cerebrais.
• Ubiquamente expresso com níveis mais elevados no coração, substância negra e rim, o ARF6 localiza-se em múltiplos compartimentos de membrana, incluindo a membrana plasmática, endossomas, Golgi, e é modificado pós-traducionalmente por miristoilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio compreende os aminoácidos 1–175 do ARF6 humano, abrangendo o domínio de ligação ao GTP terminal N; o anticorpo policlonal resultante pode detetar as conformações carregadas com GDP e GTP.
• Espera-se que a análise por Western blot revele uma banda em aproximadamente 20 kDa; utilize lisados de linhas celulares ou tecidos humanos, de camundongo ou de rato como controlos positivos.
• Para imunofluorescência/ICC, antecipa-se a coloração do ARF6 na membrana plasmática, endossomas de reciclagem e vesículas intracelulares; as condições de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para alvos associados à membrana.
• As aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas utilizando proteína ARF6 recombinante ou fragmentos de péptidos; considere a inclusão de controlos negativos para avaliar a ligação de fundo.

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