Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ARMET/ARP/MANF para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P55145

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MANF (ARMET/ARP)

• Fator neurotrófico derivado de astrócitos mesencefálicos (MANF), também conhecido como proteína rica em arginina (ARMET/ARP), é um fator neurotrófico secretado que promove a sobrevivência de neurônios dopaminérgicos e modula a transmissão GABAérgica na substância negra. Referências relacionadas: PMID:12794311
• O MANF inibe a proliferação celular e a morte celular induzida por estresse do retículo endoplasmático (RE). É retido no RE/retículo sarcoplasmático através da associação com a chaperona HSPA5/BiP em condições normais e é secretado durante o estresse de RE. Referências relacionadas: PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• O MANF secretado liga-se ao 3-O-sulfogalactosilceramida (sulfatídeo) nas membranas das células alvo, promovendo a captação celular por endocitose, o que é necessário para o seu papel na atenuação do estresse de RE e da toxicidade celular em condições hipóxicas. Referências relacionadas: PMID:29497057
• O MANF é essencial para o desenvolvimento pulmonar embrionário, a arquitetura da polpa branca esplênica pós-natal, a ossificação endocondral e a reparação do músculo esquelético, onde regula as transições fenotípicas de macrófagos para limitar a inflamação.
• Subcelularmente, o MANF localiza-se no lúmen do retículo endoplasmático e no lúmen do retículo sarcoplasmático em condições normais, e é secretado em resposta ao estresse.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de pontes dissulfeto, fosforilação e adição de ácido siálico. O MANF atua nas vias de resposta à proteína desnaturada (UPR) e de resposta ao estresse.
• Mutações no MANF estão associadas à surdez, diabetes mellitus e nanismo, destacando seus diversos papéis fisiológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Desenho do imunógeno: O anticorpo foi produzido contra uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 25-182 do MANF humano, cobrindo o polipeptídeo maduro. Esta região é bem conservada entre humanos, camundongos e ratos, suportando a reatividade cruzada.
• Western blot (WB): O peso molecular previsto é de 21 kDa; no entanto, considere que modificações pós-traducionais (por exemplo, glicosilação) podem causar ligeiros deslocamentos das bandas. Valide com controles positivos apropriados e considere modelos de indução de estresse de RE para avaliar a secreção regulada.
• Imuno-histoquímica (IHC-P) e imunocitoquímica (IF/ICC): Devido à secreção e localização no RE do MANF, certifique-se de uma permeabilização adequada e inclua marcadores de RE para estudos de co-localização. Otimize a recuperação de antígeno para secções embebidas em parafina.
• Imunoprecipitação (IP) e ELISA: A natureza policlonal fornece capacidade robusta de captura e detecção. Para ELISA sanduíche, considere o emparelhamento com um anticorpo monoclonal que reconheça um epítopo distinto.
• Nota geral: Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada no seu sistema de ensaio específico. Inclua sempre controles de isótipo e negativos apropriados.

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