Anticorpo monoclonal de coelho anti-ARPC5 (p16-ARC) para WB e ELISA - O15511

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de p16-ARC/ARPC5

• ARPC5, também conhecido como p16-ARC, é a subunidade de 16 kDa do complexo Arp2/3, um regulador fundamental da nucleação e ramificação da actina. Referências relacionadas: PMID:9230079
• O complexo Arp2/3 responde a fatores promotores de nucleação (NPFs) para gerar redes de actina ramificadas, que fornecem a força mecânica para a motilidade celular e a organização citoplasmática. Referências relacionadas: PMID:9230079
• Além do citoplasma, a polimerização da actina mediada pelo Arp2/3 nuclear favorece a transcrição gênica e facilita o reparo por recombinação homóloga de quebras de dupla fita no DNA. Referências relacionadas: PMID:29925947
• ARPC5 é encontrado em vários compartimentos subcelulares: citoplasma, citoesqueleto, projeções celulares e núcleo, em concordância com suas funções citoplasmáticas e nucleares duplas.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e conjugação semelhante à ubiquitina, juntamente com o splicing alternativo, contribuem para a versatilidade estrutural e funcional de ARPC5.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1–100 de ARPC5 humano; portanto, é provável que o anticorpo tenha como alvo o domínio N-terminal. Confirme se o seu sistema experimental expressa isoformas de ARPC5 que contenham essa região.
• Para Western blot (WB), ARPC5 migra aproximadamente a 16 kDa. Use um gel de SDS-PAGE de 12–15% e inclua marcadores de baixo peso molecular. Valide a detecção com lisados de controle positivo de amostras humanas, de camundongo ou de rato.
• Em aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento e a diluição do anticorpo utilizando antígeno purificado ou amostras que contenham o alvo. O anticorpo é adequado tanto para formatos de ELISA direto quanto sanduíche.
• Como ARPC5 é conservado entre humanos, camundongos e ratos, este anticorpo pode ser utilizado em estudos entre espécies. No entanto, recomenda-se realizar uma validação específica para a espécie no sistema-modelo do usuário.
• Para ensaios funcionais nucleares, considere o fracionamento subcelular para enriquecer a fração nuclear de ARPC5, uma vez que a proteína transita entre os compartimentos citoplasmático e nuclear.

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