Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-ASAH1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13510

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ASAH1 (Ceramidase Ácida)

• ASAH1 codifica uma enzima lisossomal que hidrolisa ceramidas em esfingosina e ácidos graxos livres em pH ácido, com maior eficiência catalítica frente às C12-ceramidas (PubMed:10610716, PubMed:15655246, PubMed:7744740). Referências relacionadas: PMID:10610716 PMID:15655246 PMID:7744740
• A enzima também catalisa a reação inversa, sintetizando ceramidas a partir de esfingosina e ácidos graxos, com preferência por D-eritro esfingosina e ácidos graxos C12 ou C14 (PubMed:12764132, PubMed:12815059). Referências relacionadas: PMID:12764132 PMID:12815059
• ASAH1 também apresenta atividade de N-aciletanolamina hidrolase, contribuindo para a regulação de moléculas bioativas de sinalização lipídica (PubMed:15655246). Referências relacionadas: PMID:15655246
• Ao regular os níveis de ceramida, esfingosina e esfingosina-1-fosfato na epiderme, ASAH1 medeia a diferenciação induzida por cálcio dos queratinócitos epidérmicos (PubMed:17713573). Referências relacionadas: PMID:17713573
• ASAH1 regula indiretamente a apoptose induzida pelo fator de necrose tumoral (TNF) por meio do equilíbrio entre ceramida e esfingosina (Por similaridade).
• Em células adrenocorticais, ASAH1 pode regular diretamente a esteroidogênese ao se ligar ao receptor nuclear NR5A1 e regular negativamente sua atividade transcricional (PubMed:22261821). Referências relacionadas: PMID:22261821
• A localização subcelular inclui o lisossomo, mas ASAH1 também pode ser encontrada no núcleo, citoplasma e secretada.
• ASAH1 é amplamente expressa, com maior expressão no coração.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 140–389) cobre grande parte da sequência madura da ceramidase ácida; esse design pode gerar anticorpos que reconhecem tanto o precursor de comprimento total quanto as formas processadas. Recomenda-se validar a detecção de isoformas no seu sistema de amostras.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 45 kDa, mas o processamento pode gerar fragmentos menores. Utilize condições redutoras e verifique os padrões de bandas com controles adequados, especialmente em lisados de humano, camundongo ou rato.
• Em experimentos de IF/ICC, as condições ideais de fixação e permeabilização devem ser determinadas para preservar a localização lisossomal. A co-coloração com marcadores de organelas pode ajudar a confirmar a especificidade.
• Ao utilizar este anticorpo em ELISA, considere sua natureza policlonal para reagente de captura ou detecção; o pareamento com um anticorpo monoclonal pode melhorar a relação sinal-ruído. Otimize as condições de revestimento e bloqueio para o seu formato de ensaio específico.

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