Anticorpo Policlonale de Coelho Anti-ASAH2 para WB, ELISA - Q9NR71

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Ceramidase Neutra (ASAH2)

• ASAH2 codifica a ceramidase neutra, um membro da família das ceramidases, também conhecida como BCDase, LCDase, N-CDase e HNAC1.
• Funciona como uma ceramidase da membrana plasmática que hidrolisa ceramidas em esfingosina e ácidos graxos livres em pH neutro, e também pode catalisar a reação de síntese reversa. Referências relacionadas: PMID:10781606, PMID:16229686, PMID:26190575, PMID:11278489, PMID:17475390
• Juntamente com a esfingomielinase, participa da degradação da esfingomielina para produzir os lipídios bioativos esfingosina e esfingosina-1-fosfato. Referências relacionadas: PMID:16061940
• Desempenha um papel na digestão de esfingolipídios alimentares no trato intestinal (por similaridade).
• Ceramidas, esfingosina e esfingosina-1-fosfato regulam processos celulares chave como proliferação, apoptose e diferenciação. Referências relacionadas: PMID:15946935, PMID:19345744, PMID:24798654
• A localização subcelular inclui a membrana plasmática (rafts/caveolae), aparelho de Golgi, mitocôndrio e secreção para o espaço extracelular (exossomos).
• Expressa principalmente no intestino, com expressão adicional em rins, músculo esquelético e coração; observe que a detecção ubíqua pode ser influenciada pelo paralog ASAH2B. Referências relacionadas: PMID:17334805, PMID:10781606
• Contém características estruturais como pontes dissulfeto, sítios de N‑glicosilação, um domínio de ligação ao zinco e sítios de fosforilação/ubiquitinação, refletindo sua regulação e associação à membrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 80–340, uma região dentro do domínio extracelular de ASAH2. Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 86 kDa; condições redutoras e desnaturantes são recomendadas para resolver com precisão a proteína glicosilada.
• Para aplicações de ELISA, considere usar o imunógeno de proteína recombinante como controle positivo e otimizar as condições de revestimento e os reagentes de detecção para obter a melhor relação sinal-ruído.
• Dada a natureza policlonal, a consistência lote a lote deve ser verificada, e o anticorpo pode reconhecer múltiplos isoformas ou produtos de clivagem — valide em lisados de tecido ou células humanas, de camundongo ou de rato relevantes.
• Amostras enriquecidas em esfingolipídios (por exemplo, tecido intestinal ou renal) podem fornecer detecção endógena ideal; no entanto, etapas de pré-absorção ou bloqueio podem ser necessárias para reduzir a ligação não específica em matrizes complexas.

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