Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ASC/TMS1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9ULZ3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ASC/TMS1

• A proteína semelhante a speck associada à apoptose contendo um CARD (ASC/TMS1) é um mediador chave da apoptose e inflamação. Ela promove a apoptose mediada por caspases envolvendo predominantemente a caspase-8 e também a caspase-9, provavelmente de maneira específica ao tipo celular. Referências relacionadas: PMID:11103777, PMID:12646168
• O ASC funciona como um adaptador integral na montagem de vários inflamaçossomos (NLRP1, NLRP2, NLRP3, NLRP6, AIM2 e provavelmente IFI16), que recrutam e ativam a caspase-1, levando ao processamento e secreção de citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957
• Através de seus domínios pirina e CARD, o ASC medeia interações homotípicas que nucleiam a formação de filamentos de caspase-1, atuando como uma plataforma para polimerização da caspase-1 e piroptose de macrófagos. Referências relacionadas: PMID:14499617, PMID:19234215, PMID:24630722
• O ASC é localizado no citoplasma, núcleo, retículo endoplasmático, mitocôndrias e membrana do aparelho de Golgi; é recrutado para inflamaçossomos após ativação.
• Também modula a ativação transcricional de citocinas e quimiocinas independente do inflamaçossomo, envolvendo as vias de sinalização AP-1, NF-kappa-B, MAPK e caspase-8. Referências relacionadas: PMID:12486103, PMID:16585594
• Amplamente expresso em baixos níveis, detectado em leucócitos de sangue periférico, pulmão, intestino delgado, baço e cólon; expressão confirmada em células epiteliais pulmonares em nível proteico. Referências relacionadas: PMID:23229815
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e conjugação Ubl (ligação isopeptídica); a proteína está implicada na supressão de tumores.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os 91 aminoácidos terminais N, que incluem o domínio pirina (PYD); o anticorpo pode reconhecer tanto a forma completa quanto quaisquer isoformas terminais N. Para aplicações que exigem a detecção de isoformas específicas, recomenda-se a validação com controles apropriados.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda principal em torno de 22 kDa; no entanto, potenciais modificações pós-traducionais ou fragmentos de clivagem podem produzir bandas adicionais; controles de carregamento e marcadores de peso molecular devem ser usados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), as condições de permeabilização e fixação devem ser otimizadas, pois o ASC se localiza em múltiplos compartimentos subcelulares. Os padrões de coloração nuclear e citoplasmática podem variar dependendo do estado de ativação.
• Aplicações de imunoprecipitação (IP) e ELISA também são validadas; considere o uso de lisados frescos e a inclusão de inibidores de proteases para preservar as interações proteicas.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, a homologia da sequência deve ser verificada para estudos nestas espécies, e experimentos piloto são aconselhados.

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