Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ASMT para WB, IHC-P, ELISA - P46597

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ASMT

• A ASMT (Acetilserotonina O-metiltransferase), também conhecida como Hidroxiindol O-metiltransferase (HIOMT), é a enzima chave que catalisa a etapa final da biossíntese de melatonina: a transferência de um grupo metil da S-adenosil-L-metionina para a N-acetilserotonina para produzir melatonina (N-acetil-5-metoxitriptamina).
• O gene ASMT sofre splicing alternativo, resultando em múltiplas variantes de transcrição que codificam diferentes isoformas proteicas.
• Em nível proteico, a ASMT é predominantemente expressa na glândula pineal, onde desempenha um papel crítico na regulação dos ritmos circadianos e da reprodução sazonal por meio da secreção de melatonina.
• Na retina, foi detectada uma expressão de mRNA muito baixa, mas a proteína ASMT está ausente, indicando uma regulação tecido-específica desta enzima. Referências relacionadas: PMID:7989373 PMID:8574683
• A ASMT pertence à superfamília das metiltransferases e requer S-adenosil-L-metionina como doador de metil para sua atividade catalítica.
• A proteína é anotada sob o metabolismo lipídico, destacando uma ligação potencial entre a síntese de melatonina e vias metabólicas mais amplas.
• Estudos estruturais (evidenciados por anotações de estrutura 3D) revelaram a arquitetura do sítio ativo da enzima, facilitando pesquisas sobre seu mecanismo catalítico e desenho de inibidores.
• A proteômica baseada em espectrometria de massa confirmou a expressão de ASMT na glândula pineal, apoiando sua utilidade como biomarcador da função pineal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 1-298 do ASMT humano (NP_001164510.1). Esta sequência quase completa provavelmente gerará anticorpos que reconhecem múltiplos epítopos lineares, tornando-a adequada para detectar proteína desnaturada em Western blot.
• Para IHC-P, considere otimizar as condições de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo, pois anticorpos policlonais podem apresentar maior fundo em tecidos fixados em formaldeído e embebidos em parafina.
• Em ELISA, o anticorpo pode detectar ASMT recombinante ou nativo; no entanto, a reatividade cruzada com outras metiltransferases deve ser validada, especialmente ao testar amostras de espécies com alta homologia de sequência.
• Ao utilizar este anticorpo em tecidos de camundongo ou rato, confirme a reatividade cruzada por meio de alinhamento de sequência ou titulação preliminar, dado que o imunógeno é derivado de humano.
• Para WB, espere uma banda em aproximadamente 38 kDa; bandas adicionais de isoformas ou modificações pós-traducionais podem aparecer e devem ser verificadas com controles apropriados.

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