Anticorpo policlonal de coelho Anti-ASNA1 para WB, IF/ICC, ELISA - O43681

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ASNA1 (GET3)

• ASNA1, também conhecida como ATPase GET3, ARSA-I ou TRC40, é uma ATPase que facilita a entrega pós-traducional de proteínas ancoradas na cauda (TA) à membrana do retículo endoplasmático.
  Referências relacionadas: PMID:17382883
• A enzima reconhece o domínio transmembrana de proteínas TA recém-sintetizadas no citosol e forma um complexo de direcionamento que interage com os receptores de membrana do RE GET1/WRB e CAMLG/GET2.
• A ligação e hidrólise de ATP controlam as transições conformacionais: a ligação de ATP impulsiona o fechamento do homodímero para o reconhecimento do substrato, enquanto a hidrólise é necessária para a inserção da proteína TA e a subsequente reciclagem da GET3.
• A ASNA1 também pode participar da sinalização da insulina.
• Subcelularmente, a GET3 localiza-se no citoplasma, retículo endoplasmático e núcleo (incluindo o nucléolo), refletindo seu ciclo dinâmico de direcionamento.
• Análises de expressão tecidual mostram que a ASNA1 está presente nas células epiteliais do fígado, rim e estômago, além da medula adrenal, ilhotas pancreáticas, polpa vermelha do baço e músculo cardíaco/esquelético.
• A ASNA1 é classificada como hidrolase, proteína de ligação a ATP e metaloproteína de zinco, e está associada a cardiomiopatia e outras variantes de doenças.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante que cobre os aminoácidos 1-348 da ASNA1 humana, o que representa a proteína de comprimento total. Isso indica que o anticorpo pode reconhecer múltiplos epitopos em toda a extensão da proteína.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 39 kDa (peso molecular teórico ~38,8 kDa) em lisados de células totais de tecidos humanos, de camundongo ou de rato.
• Ao realizar imunofluorescência (IF/ICC), utilize protocolos de permeabilização que permitam o acesso do anticorpo aos compartimentos citoplasmático, do RE e nuclear, já que a ASNA1 se localiza nos três locais.
• Valide a especificidade do anticorpo no seu sistema experimental usando controles adequados (por exemplo, knockdown, peptídeo de bloqueio) para confirmar a autenticidade do sinal, especialmente devido à possibilidade de coloração nucléolar.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção, mas a diluição ótima e a compatibilidade de pares devem ser determinadas experimentalmente.

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