Anticorpo policlonal de coelho anti-AT1R/AGTR1 para WB, ELISA - P30556

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do AT1R/AGTR1

• O receptor de angiotensina II tipo 1 (AT1R) é um receptor acoplado à proteína G (GPCR) com sete domínios transmembranares que se liga à angiotensina II, um potente peptídeo vasoconstritor, e regula de forma crítica a pressão arterial, a retenção de sódio e a homeostase de fluidos. Após a ligação ao ligante, o AT1R se acopla às proteínas G da família Gq, desencadeando a ativação da fosfolipase C, o aumento do cálcio intracelular e a estimulação da proteína quinase C, que mediam seus efeitos fisiológicos posteriores. Referências relacionadas: PMID:15611106 PMID:1567413 PMID:25913193
• Durante a infecção por SARS-CoV-2, o AT1R facilita a entrada viral ao reconhecer e internalizar complexos de ACE2–proteína spike por meio de endocitose dependente de dinamina 2.
• O AT1R está localizado principalmente na membrana celular e é expresso nos tecidos hepático, pulmonar e adrenal.
• Modificações pós-traducionais, incluindo a formação de pontes dissulfeto, a palmitoilação e a fosforilação, regulam a conformação, o tráfego e a transdução de sinais do AT1R.
• O anticorpo foi produzido contra uma proteína recombinante correspondente aos aminoácidos 294–388, uma região localizada no domínio C-terminal intracelular, tornando-o adequado para detectar o receptor em lisados celulares totais e ensaios ELISA.
• Variações genéticas no AGTR1 foram associadas à hipertensão e a fenótipos de doenças cardiovasculares.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para western blot, espera-se uma banda específica próxima de 41 kDa. Considere utilizar frações de membrana ou lisados celulares totais de tecidos como fígado, pulmão ou glândula adrenal para enriquecer o receptor.
• O imunógeno tem como alvo o domínio intracelular C-terminal (resíduos 294–388), que pode ser bem conservado entre humanos, camundongos e ratos, sustentando a reatividade cruzada observada. Valide a detecção em seu sistema de amostras utilizando controles positivos apropriados.
• No ELISA, considere revestir a placa com o imunógeno recombinante ou com um peptídeo da região C-terminal. Otimize empiricamente a concentração de revestimento e as condições de bloqueio.
• Como o AT1R é um GPCR que pode sofrer modificações pós-traducionais, podem surgir alterações de mobilidade ou múltiplas bandas no WB; tratamentos de desglicosilação ou com fosfatase podem ser utilizados para confirmar a especificidade.

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