Anti-ATF4 Coelho pAb para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18848

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATF4

• ATF4, também conhecido como CREB-2 ou TaxREB67, é um membro da família de fatores de transcrição ATF/CREB e desempenha papéis fundamentais na adaptação ao estresse celular e em processos metabólicos normais.
• Atua como o fator de transcrição mestre da resposta integrada ao estresse (ISR), sendo induzido traduzionalmente após a fosforilação de EIF2S1 durante estresse do RE, privação de aminoácidos, estresse mitocondrial ou estresse oxidativo. Referências relacionadas: PMID:31023583, PMID:32132707
• Regula a homeostase metabólica ativando genes envolvidos na síntese de aminoácidos (por exemplo, ASNS), balanço redox e função mitocondrial, e pode promover a sobrevivência celular ou, quando associado a DDIT3/CHOP, desencadear apoptose. Referências relacionadas: PMID:11960987, PMID:18940792, PMID:15775988
• Envolvido no desenvolvimento ósseo ao promover a diferenciação de osteoblastos e a síntese de colágeno tipo I, parcialmente através da fosforilação por RPS6KA3/RSK2. Referências relacionadas: PMID:15109498
• Exibe localização subcelular difusa, principalmente no núcleo, mas também detectado no citoplasma, membrana celular e centrossomo.
• Sujeito a várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, hidroxilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e estabilidade.
• Contribui para a regulação do ritmo circadiano ao ativar periodicamente a expressão de PER2 e SLC6A4.
• Interage com DISC1 em neurônios para regular a plasticidade sináptica e a memória de longo prazo; também se liga ao elemento potenciador responsivo ao Tax do HTLV-I. Referências relacionadas: PMID:31444471

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aminoácidos 260–351) do ATF4 humano, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo neste domínio; considere o alinhamento de sequências ao avaliar a reatividade cruzada com outras espécies.
• A expressão do ATF4 é altamente induzida sob condições de estresse; para detecção de baixa abundância, pré-trate células com indutores de estresse do RE (por exemplo, tunicamicina ou tapsigargina) ou meio de privação de aminoácidos para aumentar o sinal.
• Este anticorpo policlonal pode detectar ATF4 em ~39 kDa; note que o ATF4 pode sofrer degradação rápida, portanto, inclua inibidores de protease e evite ciclos de congelamento/descongelamento dos lisados.
• Para imuno-histoquímica ou imunofluorescência, padrões de coloração nuclear e citoplasmática podem ser observados; valide a intensidade de fluorescência em amostras tratadas com estresse versus não tratadas.
• Como um anticorpo policlonal de coelho, a consistência entre lotes e as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação e tipo de amostra.

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