Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ATF6 para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P18850

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATF6

• O ATF6 alfa (fator de transcrição ATF-6 alfa dependente de AMP cíclico) é sintetizado como um precursor incorporado à membrana do retículo endoplasmático (RE) que, após o estresse do RE, sofre proteólise intramembranar regulada para liberar o domínio ativo do fator de transcrição. Referências relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• O fator de transcrição processado se transloca para o núcleo e se liga aos elementos de resposta ao estresse do RE (ERSE: 5'-CCAAT-N9-CCAC[GA]-3' e ERSE II: 5'-ATTGG-N-CCACG-3') em cooperação com NF-Y para ativar os genes-alvo da UPR. Referências relacionadas: PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11163209, PMID:11779464
• O ATF6 também pode participar da transcrição dependente do fator de resposta sérica e está envolvido no desenvolvimento da fóvea e na função dos fotorreceptores do tipo cone na retina. Referências relacionadas: PMID:26029869
• Subcelularmente, o ATF6 circula entre a membrana do RE, a membrana do aparelho de Golgi e o núcleo, dependendo do seu estado de ativação.
• É expresso de forma ubíqua nos tecidos humanos.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, formação de ligações isopeptídicas e conjugação semelhante à ubiquitina, com múltiplos sítios de fosforilação de serina/treonina.
• Principais processos biológicos: ativador, ligação ao DNA, estresse do retículo endoplasmático, resposta a proteínas mal dobradas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 190–300 do ATF6 humano, um segmento localizado no domínio funcional N-terminal. Esse desenho pode favorecer a detecção da forma do fator de transcrição; no entanto, recomenda-se a validação sob condições de estresse do RE, como tratamento com tunicamicina ou tapsigargina.
• No western blot (WB), o anticorpo pode detectar bandas correspondentes ao ATF6 de comprimento total (~90–100 kDa) ou à forma ativa clivada (~50 kDa), dependendo do estado de estresse do RE celular. Otimize a preparação das amostras e inclua controles apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere a recuperação antigênica induzida por calor e teste o anticorpo em múltiplas diluições em cortes do tecido-alvo.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), é necessária a permeabilização; espere padrões de marcação tanto no RE quanto no núcleo após a indução da UPR.

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