Anticorpo Monoclonal Anti-ATG12 de Coelho para WB, ELISA - O94817

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATG12

• ATG12 é uma proteína semelhante à ubiquitina essencial para a formação de vesículas de autofagia. Ela se conjuga com ATG5 por meio de um sistema semelhante ao da ubiquitina que envolve ATG7 (tipo E1) e ATG10 (tipo E2), e o conjugado ATG12-ATG5 atua como uma enzima tipo E3 para a lipidicação de ATG8 e a associação com membranas (Por similaridade).
• O complexo ATG12-ATG5-ATG16L1 recruta LRRK2 para lisossomos estressados, induzindo a atividade quinase de LRRK2 sob estresse lisossomal (Por similaridade).
• ATG12 pode atuar como um fator proviral: em associação com ATG5, ela regula negativamente a imunidade antiviral inata ao prejudicar a produção de IFN tipo I após a infecção por VSV. Referências relacionadas: PMID:17709747
• É necessária para a tradução do RNA do vírus da hepatite C (HCV) que entra na célula para iniciar a replicação, mas não para a manutenção após a infecção estar estabelecida. Referências relacionadas: PMID:19666601
• ATG12 se localiza no citoplasma e nas membranas da estrutura pré-autofagossômica, o que é consistente com seu papel na formação do autofagossomo.
• A proteína é expressa de forma ubíqua em todos os tecidos humanos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e formação de ligação isopeptídica como parte da via de conjugação Ubl.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 41-140 da ATG12 humana, que pode reconhecer tanto a ATG12 livre quanto o conjugado ATG12-ATG5. Considere isso ao interpretar os resultados em ensaios relacionados à autofagia.
• Para Western blot, valide a detecção em torno de 15 kDa (ou 55-60 kDa para o conjugado) em lisados de células humanas e de camundongo. Use controles adequados para a indução da autofagia (por exemplo, inanição ou estresse lisossomal).
• Para ELISA, a cobertura com o peptídeo imunógeno ou proteína ATG12 recombinante pode melhorar o desempenho do ensaio. Avalie a reatividade cruzada com ATG5 e outras proteínas semelhantes à ubiquitina se a especificidade for crítica.

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