Anticorpo monoclonal de coelho anti-ATG12 para WB, IHC-P, IP, ELISA - O94817

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ATG12

• A ATG12 (proteína 12 relacionada à autofagia) é uma proteína semelhante à ubiquitina pertencente à família relacionada à autofagia (ATG), essencial para a formação do autofagossomo.
• Ela é conjugada à ATG5 por meio de um sistema de conjugação semelhante à ubiquitina que envolve ATG7 (semelhante a E1) e ATG10 (semelhante a E2), formando um conjugado ATG12-ATG5 que atua como uma enzima semelhante a E3 para a lipidização da família ATG8, uma etapa crítica na expansão da membrana do autofagossomo.
• O conjugado ATG12-ATG5, em complexo com ATG16L1, é necessário para o recrutamento de LRRK2 aos lisossomos sob estresse e para a indução da atividade quinase de LRRK2 em condições de estresse lisossomal.
• A ATG12 está localizada no citoplasma e na membrana da estrutura pré-autofagossomal.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e formação de uma ligação isopeptídica durante a conjugação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• A ATG12 desempenha um papel nas interações hospedeiro-vírus: atua como um fator proviral para o vírus da hepatite C (HCV), apoiando a tradução do RNA viral que entra na célula, e regula negativamente a resposta imune antiviral inata contra o vírus da estomatite vesicular (VSV), prejudicando a produção de interferon do tipo I. Referências relacionadas: PMID:17709747, PMID:19666601
• A expressão tecidual é ubíqua.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) da ATG12 humana, que pode reconhecer tanto a ATG12 não conjugada (15 kDa) quanto o conjugado ATG12-ATG5 (~55 kDa). Para Western blot, considere o uso de condições redutoras para distinguir essas formas.
• Para IHC-P, pode ser necessária a recuperação antigênica; valide em tecidos que se sabe expressarem ATG12 (a expressão é ubíqua, mas condições de aumento da autofagia podem intensificar a coloração).
• Para IP, o anticorpo é adequado para capturar complexos nativos de ATG12; assegure condições adequadas de lise para preservar as interações proteicas.
• As aplicações em ELISA podem ser desenvolvidas utilizando este anticorpo como reagente de captura ou detecção; teste a reatividade cruzada com a ATG12 de camundongo, se necessário.

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