Anticorpo Policlonais Anti-ATG14 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZNE5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATG14

• ATG14 (também conhecida como Atg14L ou Barkor) é um regulador chave da autofagia, necessário tanto para a autofagia basal quanto para a induzida. Ela funciona como parte do complexo PI3-quinase específico da autofagia PI3KC3-C1, determinando sua localização. Referências relacionadas: PMID:18843052, PMID:19050071
• ATG14 promove a formação de autofagossomos e a conjugação de MAP1LC3/LC3 à fosfatidiletanolamina, uma etapa crítica no alongamento do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:19270696, PMID:20713597
• ATG14 promove a translocação de BECN1 da rede trans-Golgi para os autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:20713597
• ATG14 aumenta a atividade de PIK3C3 de forma dependente de BECN1.
• ATG14 é essencial para a fosforilação dependente de autofagia de BECN1, estimula a fosforilação de BECN1 e suprime a fosforilação mediada por AMPK de PIK3C3. Referências relacionadas: PMID:23878393
• Ela se liga ao complexo t-SNARE STX17-SNAP29 nos autofagossomos e o prepara para a interação com VAMP8, promovendo a fusão autofagossomo-endolisossomo. Referências relacionadas: PMID:25686604, PMID:37632749
• ATG14 se localiza no citoplasma, membrana do retículo endoplasmático, membrana da estrutura preautofagossomal e membrana do autofagossomo, refletindo seus papéis na biogênese e maturação de autofagossomos.
• ATG14 é uma proteína de coil-coil que sofre splicing alternativo; é fosforilada e ubiquitinada, conforme indicado por estudos de proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 340–440) da ATG14 humana, que é conservada entre as espécies, o que suporta a reatividade cruzada com camundongo e rato. Realize a validação no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, é esperada uma banda de aproximadamente 55 kDa; considere usar lisados de células totais ou frações subcelulares para experimentos de indução da autofagia.
• Os protocolos de IF/ICC devem incluir permeabilização para detectar a ATG14 localizada na membrana dos autofagossomos e outros compartimentos; recomenda-se o uso de controles negativos e positivos adequados.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização da concentração do antígeno de revestimento e da diluição do anticorpo; inclua uma curva padrão para avaliação quantitativa.

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