Anticorpo policlonal de coelho anti-ATG7 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95352

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ATG7

• A ATG7 é uma enzima ativadora semelhante à E1, essencial para dois sistemas de conjugação semelhantes à ubiquitina que promovem a autofagia e o transporte do citoplasma para o vacúolo (Cvt).
• Ela ativa a ATG12 para a conjugação com a ATG5 e prepara as proteínas da família ATG8 (como a LC3) para a lipidização com fosfatidiletanolamina, uma etapa fundamental para a associação com a membrana do autofagossomo.
• A ATG7 facilita a conversão de LC3-I em LC3-II lipidada nas membranas dos autofagossomos, um marcador fundamental do fluxo autofágico. Referências relacionadas: PMID:34161705
• Além da autofagia canônica, a ATG7 é necessária para a mitofagia, ajudando a manter a homeostase mitocondrial e a prevenir a produção excessiva de espécies reativas de oxigênio (ROS).
• Ela modula a atividade de p53/TP53 para influenciar o ciclo celular e a sobrevivência sob estresse metabólico, além de participar de processos como a homeostase axonal, a manutenção de células-tronco hematopoiéticas, a formação de grânulos das células de Paneth e a diferenciação do tecido adiposo.
• A ATG7 também contribui para a regulação do ritmo circadiano ao mediar a degradação autofágica do repressor do relógio CRY1, conectando a autofagia ao relógio hepático e ao metabolismo da glicose.
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma e em estruturas pré-autofagossomais, onde coordena eventos de conjugação relacionados à autofagia.
• A ATG7 é amplamente expressa, com os níveis mais elevados observados nos rins, fígado, linfonodos e medula óssea.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo corresponde aos aminoácidos 500–676 da ATG7 humana, uma região próxima à extremidade C-terminal que é bem conservada entre os mamíferos. Esse desenho pode contribuir para a reatividade cruzada com a ATG7 de camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 78 kDa; considere carregar uma quantidade adequada de proteína e otimizar as condições de transferência para capturar a proteína de comprimento total.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P) e na imunofluorescência (IF/ICC), a marcação da ATG7 pode aparecer difusa no citoplasma, com possível enriquecimento pontual nas estruturas pré-autofagossomais sob condições indutoras de autofagia. Valide com marcadores de autofagia (por exemplo, LC3) no tecido ou modelo celular relevante.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; no entanto, recomenda-se combiná-lo com um anticorpo pareado adequado e otimizar as condições de revestimento para obter o melhor desempenho.
• Devido ao papel central da ATG7 na autofagia, este anticorpo pode ser útil para monitorar o fluxo autofágico, a mitofagia e vias relacionadas. Inclua sempre controles apropriados (por exemplo, inibidores da autofagia, como a cloroquina) para garantir a especificidade da degradação autofágica.

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