Anticorpo Monoclonal Anti-ATM para WB, IHC-P, ELISA - Q13315

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATM

• ATM (Ataxia telangiectasia mutated) é uma proteína quinase serina/treonina codificada pelo gene ATM, pertencente à família PIKK de quinases envolvidas na sinalização de danos no DNA.
• Atua como sensor primário de quebras duplas de DNA (DSBs) e estresse genotóxico, como radiação ionizante e luz ultravioleta A. Reconhece e fosforila proteínas substrato no motivo consenso [ST]-Q para iniciar a sinalização de ponto de verificação, apoptose e reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365
• Fosforila numerosos efetores a jusante, incluindo a histona H2AX (em Ser-139), CHEK2, p53/TP53, BRCA1 e FANCD2, coordenando assim a parada do ciclo celular e as vias de reparo de danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669
• Localiza-se no núcleo, onde medeia principalmente a sinalização de danos no DNA, mas também reside em vesículas citoplasmáticas, centrossomos e peroxissomos, refletindo seus diversos papéis celulares.
• É amplamente expresso em tecidos humanos, com detecção em pâncreas, rim, músculo esquelético, fígado, pulmão, placenta, cérebro, coração, baço, timo, testículo, ovário, intestino delgado, cólon e leucócitos.
• Regula apexofagia fosforilando PEX5 nos peroxissomos em resposta a espécies reativas de oxigênio, direcionando-o para ubiquitinação e degradação. Referências relacionadas: PMID:26344566
• Funções adicionais incluem a garantia da exclusão alélica durante o desenvolvimento de células B, o controle da degradação do mRNA da histona dependente de replicação e atuação como potencial supressor tumoral.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2619–2939 da ATM humana, localizado na região C-terminal. Valide a especificidade do anticorpo usando controles apropriados, especialmente quando for alvo de isoformas ou variantes de splicing.
• Para Western blot, a ATM migra aproximadamente a 351 kDa. Use géis de poliacrilamida de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência estendidos para garantir a transferência eficiente dessa proteína de grande tamanho.
• Em IHC-P, otimize os métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epitopo induzida por calor) e a concentração do anticorpo primário. Considere usar tecidos com alta expressão de ATM, como testículo ou pâncreas, como controles positivos.
• A reatividade cruzada com camundongo é relatada; se usar modelos de camundongo, confirme a adequação testando em sistemas relevantes de knockout ou knockdown.
• Como anticorpo monoclonal, oferece alta especificidade. Inclua controles biológicos positivos e negativos (por exemplo, linhas celulares competentes e deficientes em ATM) para verificar a identidade da banda.

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