Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ATM para WB, ELISA - Q13315

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATM

• Quinase de proteína serina/treonina que ativa a sinalização de ponto de verificação em resposta a quebras de fita dupla de DNA (DSBs), apoptose e estresses genotóxicos, atuando como um sensor crítico de danos ao DNA. Referências relacionadas: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Reconhece a sequência consenso do substrato [ST]-Q e fosforila proteínas-chave da resposta a danos no DNA, incluindo CHEK2, p53/TP53, BRCA1 e nibrina (NBN). Referências relacionadas: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365, PMID:10766245, PMID:10802669

• Fosforila a variante de histona H2AX na Ser-139 em locais de quebras de fita dupla, regulando assim o mecanismo de resposta a danos no DNA (Por similaridade).

• Fosforila diversos substratos, incluindo DYRK2, ATF2, ERCC6, TTC5/STRAP e PEX5, para coordenar reparo de DNA, apoptose e homeostase celular. Referências relacionadas: PMID:19965871, PMID:15916964, PMID:29203878, PMID:15448695, PMID:26344566

• Encontrada no núcleo, vesículas citoplasmáticas, centrossomos e matriz de peroxissomos, consistente com seus papéis na sinalização de danos no DNA, transporte e pexofagia.

• Expressa de forma ubíqua, com níveis mais altos em pâncreas, rim, músculo esquelético, fígado, pulmão, placenta, cérebro, coração, baço, timo, testículo, ovário, intestino delgado, cólon e leucócitos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise por western blot, espere uma banda em torno de 351 kDa. Devido ao grande tamanho da proteína, considere usar géis de gradiente de baixa porcentagem, tempos de transferência úmida estendidos e verifique a eficiência da transferência com um marcador de alto peso molecular pré-corado.
• O imunógeno é um peptídeo sintético da região C-terminal (aa 1900–2000). A acessibilidade do epítopo pode ser influenciada pela conformação da proteína; condições desnaturantes e redutoras são recomendadas.
• Como um anticorpo policlonal, pode apresentar variabilidade entre lotes. Valide cada novo lote em um controle positivo conhecido (por exemplo, lisado de células humanas expressando ATM) antes do uso.
• Para ELISA, otimize a concentração do antígeno de revestimento e as condições de detecção. O anticorpo é previsto para reconhecer ATM humano; a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada.
• Para confirmar a especificidade, considere usar amostras depletadas de ATM (por exemplo, knockdown por siRNA) ou um peptídeo competidor em seu sistema de ensaio.

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