Anticorpo policlonal de coelho anti-ATM para WB, IF/ICC, ELISA - Q13315

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ATM

• ATM, ou ataxia-telangiectasia mutada, é uma proteína quinase de serina/treonina que atua como sensor de danos no DNA, reconhecendo quebras de dupla fita (DSBs) e ativando a sinalização de pontos de controle em resposta a estresses genotóxicos, como radiação ionizante e luz ultravioleta A (PubMed:10550055, PubMed:10839545, PubMed:10910365). Referências relacionadas: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• A quinase fosforila efetores posteriores que contêm o motivo consenso [ST]-Q, incluindo a histona H2AX em Ser-139, p53/TP53, CHEK2, BRCA1, MRE11 e muitos outros, coordenando assim o reparo do DNA, a parada do ciclo celular e a apoptose (PubMed:10550055, PubMed:10766245, PubMed:10802669). Referências relacionadas: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• A ATM desempenha um papel fundamental no controle do ciclo celular e é considerada um supressor tumoral, com mutações no gene ATM associadas à ataxia-telangiectasia, uma síndrome caracterizada por neurodegeneração, imunodeficiência e predisposição ao câncer.
• Subcelularmente, a ATM está localizada principalmente no núcleo, mas também se localiza em vesículas citoplasmáticas, no centrossomo e nos peroxissomos. Em resposta a espécies reativas de oxigênio (ROS), ela se transloca para os peroxissomos e fosforila PEX5 para induzir a pexofagia (PubMed:26344566). Referências relacionadas: PMID:26344566
• A ATM é amplamente expressa em tecidos, incluindo pâncreas, rim, músculo esquelético, fígado, pulmão, placenta, cérebro, coração, baço, timo, testículo, ovário, intestino delgado, cólon e leucócitos.
• A proteína sofre fosforilação em múltiplos resíduos após danos ao DNA, o que é essencial para sua ativação e posterior direcionamento aos substratos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 2320–2566 na região C-terminal da ATM. Espera-se que este anticorpo reconheça a proteína de comprimento total (351 kDa) e possa reagir com isoformas que contenham este epítopo; valide-o em seu sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, utilize uma porcentagem de gel e condições de transferência apropriadas (por exemplo, transferência úmida com tempo prolongado) para realizar eficientemente o blotting desta proteína de alto peso molecular.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica, otimize a fixação e a permeabilização para detectar ATM nos compartimentos nuclear e citoplasmático; considere o uso de tratamentos conhecidos por induzir danos ao DNA para avaliar alterações na localização.
• Para ELISA, utilize um tampão de revestimento confiável e valide a compatibilidade do par de anticorpos quando utilizado em um ensaio sanduíche.

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