Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ATOX1 para WB, ELISA - O00244

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATOX1

• A ATOX1, também conhecida como HAH1 ou ATX1, é uma proteína de transporte de cobre que se liga e entrega o cobre citosólico às proteínas ATPases de cobre, desempenhando um papel crítico na homeostase e distribuição intracelular do cobre.
• Ela atua como uma chaperona de cobre, facilitando a transferência segura de íons de cobre para proteínas alvo, evitando assim a toxicidade do cobre e garantindo suprimento suficiente para processos enzimáticos.
• A ATOX1 pode contribuir para os mecanismos de defesa antioxidante celular, potencialmente modulando a atividade de enzimas antioxidantes dependentes de cobre.
• A proteína é expressa de forma ubíqua em todos os tecidos humanos, indicando um papel fundamental no metabolismo do cobre em diversos tipos de células.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade, localização ou interação com parceiros.
• Seu peso molecular é de aproximadamente 7 kDa (74 aminoácidos, 7402 Da), e sua estrutura tridimensional foi resolvida, revelando resíduos chave envolvidos na ligação e transferência do cobre.
• Como parte da via de transporte do cobre, a ATOX1 interage diretamente com os domínios de ligação de metal N-terminal das ATPases transportadoras de cobre (ATP7A e ATP7B), essenciais para o efluxo do cobre.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-68 da ATOX1 humana, que compreende o domínio de ligação ao cobre. Ao avaliar a reatividade cruzada com outras espécies ou isoformas, verifique a conservação da sequência nesta região.
• Para Western blotting, o tamanho esperado da banda é de aproximadamente 7 kDa. Use géis de alta concentração (por exemplo, 15% ou géis gradientes) e tempos de transferência curtos para evitar perda de proteínas pequenas. Inclua um marcador de proteína de baixo peso molecular pré-colorido.
• Em aplicações de ELISA, certifique-se de que o antígeno de revestimento contenha a sequência do imunógeno para maximizar a sensibilidade da detecção. Considere usar ATOX1 recombinante ou o peptídeo imunogênico como controle positivo.
• Verifique a especificidade do anticorpo no seu sistema modelo usando knockdown por siRNA, knockout por CRISPR ou lisados de superexpressão, pois bandas inespecíficas podem aparecer em alguns tipos de células.
• A ATOX1 humana é expressa de forma ubíqua, portanto linhas celulares comuns (por exemplo, HeLa, HEK293T) podem servir como controle positivo. Para amostras de tecido, fígado e rim geralmente apresentam expressão moderada.
• O anticorpo foi confirmado para reagir com ATOX1 humana. A reatividade cruzada com ATOX1 de camundongo ou rato não foi testada; alinhe a sequência do imunógeno com os ortólogos se a detecção multiespécie for necessária.

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