Anticorpo Policlonal Anti-ATP2B1 para WB, IF-P, ELISA - P20020

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ATP2B1

• ATP2B1 codifica a ATPase 1 transportadora de cálcio da membrana plasmática (PMCA1), membro da família de ATPases do tipo P. Está presente em várias isoformas (B, C, D, K) geradas por splicing alternativo.
• Catalisa o efluxo de cálcio impulsionado por ATP do citoplasma para o espaço extracelular, sendo essencial para a manutenção da homeostase do cálcio intracelular. Referências relacionadas: PMID:35358416
• Desempenha um papel fundamental na regulação da pressão arterial ao modular o cálcio intracelular e a produção de óxido nítrico nas células musculares lisas vasculares.
• Regula positivamente a mineralização óssea ao promover a absorção intestinal de cálcio e desempenha funções duplas na diferenciação e na sobrevivência dos osteoclastos (por similaridade).
• Modula a sensibilidade à insulina por meio da ativação de AKT1 e NOS3 dependente de cálcio/calmodulina nas células endoteliais. Referências relacionadas: PMID:29104511
• Localiza-se na membrana celular basolateral, nas membranas sinápticas e nas membranas das vesículas sinápticas; está envolvido na dinâmica sináptica de cálcio e prótons.
• Expressão específica dos tecidos: a isoforma B é ubíqua; a isoforma C é enriquecida no cérebro e nos músculos; a isoforma K é encontrada no intestino e no fígado, com alta expressão nas células epiteliais endometriais. Referências relacionadas: PMID:21400627
• Palavras-chave: splicing alternativo, ligação à calmodulina, variantes associadas a doenças (deficiência intelectual) e múltiplas hélices transmembranares.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange a região N-terminal (aminoácidos 50-150) de ATP2B1 humano. Essa região pode ser conservada entre as espécies, o que é consistente com a reatividade cruzada com camundongo e rato.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 135 kDa; considere o uso de condições redutoras e valide a detecção com controles positivos apropriados.
• Na imunofluorescência (IF-P), os protocolos de fixação e permeabilização devem ser otimizados empiricamente para o tipo de célula e a localização do alvo (membrana versus vesículas).
• As aplicações de ELISA podem exigir o revestimento com o peptídeo imunógeno ou com proteína recombinante; as condições do ensaio devem ser padronizadas na matriz de amostra relevante.
• Considerando o papel da PMCA1 na sinalização do cálcio, verifique a especificidade do anticorpo utilizando modelos de knockdown por siRNA ou de superexpressão para confirmar a identidade do alvo.

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