Anticorpo monoclonal de coelho Anti-ATP4B (ATPase Hidrogênio Potássio Beta) para IHC-P, ELISA - P51164

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATP4B

• Codificada pelo gene ATP4B, a proteína conhecida como subunidade beta da ATPase transportadora de potássio (também designada subunidade beta da ATPase H(+)/K(+) gástrica ou cadeia beta da bomba de prótons) é a subunidade beta regulatória da bomba H⁺/K⁺‑ATPase gástrica.
• Como componente central da bomba de prótons gástrica heterodimérica, facilita a troca eletroneutra de K⁺ luminar por H⁺ citoplasmático através da membrana apical das células parietais, acoplando diretamente a translocação de íons à hidrólise de ATP pela subunidade alfa catalítica.
• A subunidade beta desempenha papéis estruturais e regulatórios essenciais: é necessária para a montagem estável do complexo alfa/beta e para direcionar a bomba ativa para a membrana celular apical.
• Mecanisticamente, a ATP4B interage com o domínio de fosforilação da subunidade alfa e atua como uma catraca, estabilizando a conformação E2 voltada para o exterior e prevenindo a reação de transporte reversa.
• A localização subcelular é predominantemente na membrana plasmática apical das células parietais gástricas, consistente com sua função na secreção de ácido.
• As principais características pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e a presença de pontes dissulfeto conservadas, que são críticas para o dobramento e a estabilidade corretos; a proteína madura contém uma única hélice transmembrana e uma sequência de âncora de sinal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado como um peptídeo sintético que abrange os resíduos 192‑291 da ATP4B humana, uma região prevista como acessível no lado extracelular da membrana; isso pode favorecer a detecção da proteína nativa em IHC-P.
• Para IHC-P em tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina, considere usar seções de mucosa gástrica como controle positivo; pode ser necessária a otimização da recuperação de antígeno.
• No ELISA, o anticorpo pode reconhecer epítopos lineares dentro da região do imunógeno; as condições de revestimento da placa e as etapas de bloqueio devem ser testadas para minimizar o ruído de fundo.
• Dada a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato, o anticorpo pode ser avaliado em tecidos gástricos de roedores, embora a conservação do epítopo deva ser confirmada.
• As condições experimentais devem sempre ser validadas no sistema de amostra relevante, e controles de isotipo apropriados devem ser incluídos para avaliar a especificidade do ensaio.

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