Anti-ATP5C1 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P36542

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATP5C1

• O ATP5C1 (subunidade gama da ATP sintase F1) é uma subunidade crítica da ATP sintase mitocondrial F1F0 (Complexo V), a enzima responsável pela síntese de ATP a partir de ADP e fosfato inorgânico utilizando a força próton-motriz através da membrana mitocondrial interna. Referências relacionadas: PMID:37244256
• Esta proteína existe como duas principais isoformas: isoforma cardíaca, predominantemente expressa no músculo cardíaco e esquelético, e isoforma hepática, expressa no cérebro, fígado, rim, pele, intestino, estômago e aorta, refletindo as demandas energéticas específicas dos tecidos.
• Como subunidade gama do pedículo central, o ATP5C1 acopla a rotação impulsionada pelo fluxo de prótons no domínio de membrana F0 às mudanças conformacionais na cabeça catalítica F1, permitindo a síntese de ATP. Ele também desempenha um papel indispensável na montagem do núcleo catalítico F1, conforme evidenciado pela sua necessidade para a formação de um intermediário chave de montagem do F1. Referências relacionadas: PMID:29499186
• O ATP5C1 está localizado na membrana mitocondrial interna e contém um peptídeo de trânsito N-terminal que direciona a sua importação mitocondrial. Ele está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem regular a sua atividade ou montagem.
• O peso molecular previsto do ATP5C1 é de aproximadamente 33 kDa (32996 Da com base no UniProt), o que é consistente com a banda observada no Western blot.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo corresponde aos aminoácidos 26-298 do ATP5C1 humano (NP_001001973.1), que abrange a maior parte da proteína madura após o clívio do peptídeo de trânsito mitocondrial; portanto, espera-se que o anticorpo detecte a forma endógena madura (aproximadamente 33 kDa) no Western blot.
• Para aplicações de Western blot (WB), considere o uso de lisados proteicos enriquecidos em mitocôndrias de linhagens celulares ou tecidos (como coração, músculo esquelético ou fígado) que expressem ATP5C1, e inclua marcadores de peso molecular apropriados para confirmar a banda de 33 kDa.
• Ao aplicar este anticorpo em imuno-histoquímica (IHC) ou imunofluorescência (IF), um sinal forte pode ser observado em tecidos com alto conteúdo mitocondrial, como coração e músculo esquelético; a coloração simultânea com marcadores mitocondriais pode ajudar a verificar a localização.
• Relata-se que o anticorpo reage com ATP5C1 humano, de camundongo e de rato; no entanto, devido a possíveis diferenças de sequência entre espécies, é aconselhável validar a reatividade cruzada no sistema de amostras relevante antes de experimentos em grande escala.
• Para aplicações de ELISA e IF/ICC, recomenda-se realizar uma titulação para determinar a diluição de trabalho ideal para o tipo específico de amostra e condições experimentais.

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