Anticorpo Policlonal Anti-ATP6AP1 para WB, ELISA - Q15904

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do ATP6AP1

• O ATP6AP1 (também conhecido como Ac45, XAP-3) é uma subunidade acessória do complexo V0 da H+-ATPase vacuolar (V-ATPase), uma enzima multissubunidade que acidifica compartimentos intracelulares e, em algumas células, o ambiente extracelular. Referências relacionadas: PMID:28296633, PMID:33065002
• O complexo V-ATPase promove a ativação do mTORC1 nas membranas lisossômicas ao facilitar a atividade de fator de troca de nucleotídeos de guanina do complexo Ragulator. Referências relacionadas: PMID:22053050
• Esta subunidade direciona a V-ATPase para compartimentos especializados, como vesículas secretoras neuroendócrinas ou a borda enrugada dos osteoclastos, e está envolvida no tráfego de membranas e na fusão de membranas dependente de Ca2+. Referências relacionadas: PMID:27231034
• Em condições aeróbicas, o ATP6AP1 participa da homeostase intracelular do ferro, desencadeando a atividade das enzimas prolil-hidroxilases dependentes de Fe2+, levando à hidroxilação e degradação de HIF1A. Referências relacionadas: PMID:28296633
• O ATP6AP1 é amplamente expresso, com níveis mais elevados no cérebro e mais baixos no fígado e no duodeno.
• A proteína está localizada na membrana do retículo endoplasmático, no compartimento intermediário ER-Golgi, em vesículas sinápticas e em vesículas revestidas de clatrina.
• As modificações pós-traducionais incluem formação de pontes dissulfeto, glicosilação e fosforilação; a proteína contém um peptídeo-sinal e uma hélice transmembrana.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos resíduos 90–390 do ATP6AP1 humano, tendo como alvo uma grande região citoplasmática/luminal que pode oferecer boa acessibilidade em lisados celulares totais.
• Para western blot (WB), considere utilizar condições redutoras e validar a banda detectada em relação ao peso molecular previsto de aproximadamente 52 kDa em amostras humanas, de camundongo e de rato.
• As aplicações em ELISA podem se beneficiar da verificação da reatividade cruzada com fragmentos de proteína recombinante ou ensaios baseados em células relevantes para a biologia da V-ATPase.
• Dado o envolvimento da proteína na acidificação vesicular e no tráfego de membranas, modelos experimentais que estudem a função lisossômica, a atividade dos osteoclastos ou a secreção neuroendócrina podem ser informativos.

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